耐盐石油降解菌的分离鉴定及其降解特性研究

发布时间：2024-04-20 00:44

　　从江苏某油田附近受石油污染土壤中分离出2株以柴油为唯一碳源的耐盐石油降解菌株LS1和LS4。通过对菌株的生理生长特性、菌体的形态观察及16S rDNA基因序列分析鉴定LS1和LS4分别为假单胞菌菌属(Pseudomonas)和金黄杆菌菌属(Chryseobacterium)，两株菌都为革兰氏阴性菌。研究了不同环境条件对菌株的生长特性和柴油降解效果的影响。结果表明，菌株LS1可耐受的最高盐度(NaCl)和柴油浓度分别为6%⁸%和12000mg·L-1，菌株LS1生长的适宜pH和温度条件分别为6.0⁸.0和24³2℃。外加20³00mg/L的碳源葡萄糖、蔗糖和乳糖均能促进菌株生长，大大缩短停滞期。在盐度为6%、pH7.0、温度为32℃、投加量为10%的条件下，历经6d，菌株LS1对初始浓度为3000mg·L-1的柴油的降解率可达78.3%，菌株LS4可耐受的最高盐度(NaCl)和柴油浓度分别为6%⁸%和11000mg·L-1，菌株生长的适宜pH和温度条件分别为7.0⁹

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 石油污染现状
        1.1.1 石油污染来源
        1.1.2 石油污染的危害
    1.2 石油污染水体的修复技术
        1.2.1 物理修复技术
        1.2.2 化学修复方法
        1.2.3 生物修复
    1.3 石油降解菌研究现状
        1.3.1 石油降解菌及其降解机理
        1.3.2 耐盐石油降解菌
        1.3.3 耐盐菌的耐盐机制
    1.4 烷烃羟化酶的研究进展
    1.5 本课题的研究目的及内容
        1.5.1 研究目的及意义
        1.5.2 研究内容
第2章 耐盐石油降解菌的筛选及鉴定
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 菌株的分离与纯化
        2.2.2 形态观察
        2.2.3 生理生化鉴定
        2.2.4 菌株的分子生物学鉴定
    2.3 结果与分析
        2.3.1 降解菌的形态
        2.3.2 降解菌株的生理生化特性
        2.3.3 降解菌株的分子生物学鉴定
    2.4 本章小结
第3章 耐盐石油降解菌的生长及降解性能研究
    3.1 实验材料与仪器
        3.1.1 培养基
        3.1.2 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 菌原液的制备
        3.2.2 细菌生长量的测定
        3.2.3 菌株对石油的降解效率的测定
        3.2.4 培养条件对菌株生长的影响
        3.2.5 培养条件对菌株降解率的影响
    3.3 结果与分析
        3.3.1 培养条件对菌株生长的影响
        3.3.2 外加碳源对菌株生长的影响
        3.3.3 外加重金属离子对菌株生长的影响
        3.3.4 培养条件对菌株降解柴油效率的影响
        3.3.5 外加碳源对菌株降解率的影响
        3.3.6 重金属离子对菌株降解率的影响
    3.5 本章小结
第4章 耐盐石油降解菌烷烃羟化酶部分基因克隆
    4.1 实验材料
        4.1.1 主要仪器
        4.1.2 主要培养基
    4.2 实验方法
        4.2.1 烷烃羟化酶部分基因克隆
        4.2.2 基于烷烃羟化酶部分基因序列系统发育树分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 烷烃羟化酶部分基因测序
        4.3.2 菌株 LS1 羟化酶同源性分析
        4.3.3 菌株 LS4 羟化酶同源性分析
    4.4 本章小结
第5章 菌株耐盐机理研究
    5.1 实验材料
        5.1.1 试验药品
        5.1.2 培养基
    5.2 实验方法
        5.2.1 氨基酸含量的测定
        5.2.2 甜菜碱含量的测定
        5.2.3 菌体内谷氨酸和甜菜碱的提取
        5.2.4 外加相容性物质对菌体生长的影响实验
    5.3 结果与分析
        5.3.1 不同盐度条件下菌株细胞内的甜菜碱和谷氨酸含量
        5.3.2 外加相容性物质对菌株生长的影响
    5.4 本章小结
结论和建议
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
详细摘要



本文编号：3958621