检测传染性支气管炎病毒抗体的血凝抑制试验抗原及IB-ND-IBD-EDS-AI五联灭活疫苗的研制
发布时间：2022-05-08 20:28
传染性支气管炎（IB）是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的急性、高度接触性传染病,给世界范围内养鸡业带来巨大经济损失。本研究制备了血凝抑制（HI）试验抗原,建立了检测IBV抗体的HI试验方法；对分离的IBV流行毒株（LH株）进行了全面鉴定,并研制了IB-新城疫（ND）-传染性法氏囊病（IBD）-减蛋综合症（EDS）-禽流感（AI）五联灭活疫苗。1检测IBV抗体的HI试验抗原制备本研究比较了三种浓缩IBV方法（超速离心法、PEG沉淀法和PEG透析法）和三种酶（A型产气荚膜梭菌培养滤液、Ⅰ型卵磷脂酶C和神经氨酸酶）对制备HI试验抗原的影响。最后确定最佳方法为：将IBV（M41株）接种于10日龄SPF鸡胚,37℃孵化36h,收获尿囊液经4000g离心30min,将上清再次以25000g离心70min。浓缩的病毒液加入终浓度为3U/mL的PLC1,37℃孵育2h,制备的HI试验抗原具有较高的特异性,建立的HI试验方法可以用于检测IBV HI抗体。2IB-ND-IBD-EDS-AI五联灭活疫苗的研制本研究对IBV（LH株）种毒进行了鉴定,将毒株在鸡胚中连续传10代,测得P1、P5和P10代的病...
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
符号说明
文献综述
第一章 检验传染性支气管炎病毒血凝抑制抗体方法的建立
1 材料
1.1 菌种和毒种
1.2 鸡胚、阳性血清和抗原
1.3 试剂
1.4 仪器及耗材
2 IBV HI试验抗原的制备
2.1 IBV的浓缩
2.2 A型产气荚膜梭菌上清的制备
2.3 不同酶处理IBV后HA效价的比较
2.4 IBV HA和HI试验标准操作步骤
2.5 IBV HI试验抗原的特异性检测
3 结果
4 讨论
第二章 IB-ND-IBD-EDS-AI五联灭活疫苗的研制
1 材料
1.1 疫苗和毒株
1.2 检测抗原和试剂盒
1.3 鸡胚和鸡
1.4 培养基和普通化学试剂
1.5 仪器
2 方法
2.1 IBV(LH株)种毒的鉴定
2.2 五联灭活疫苗的制备
2.3 五联灭活疫苗的质量检验
3 结果
4 讨论
全文总结
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]表达鸡传染性支气管炎病毒S基因的重组新城疫病毒构建[J]. 焦利红,葛金英,王琪,马文芝,步志高. 中国预防兽医学报. 2010(05)
[2]鸡传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LTJ95Ⅰ株病毒攻击的免疫保护[J]. 石星明,王玫,王云峰,杨桂花,孙鹏,李继松,曾伟伟,刘胜旺. 中国预防兽医学报. 2009(03)
[3]多表位疫苗的构建策略及其在动物疫苗中的应用[J]. 张有峰,王红宁,黄勇,阳泰. 中国农业科技导报. 2008(02)
[4]应用不连续密度梯度离心纯化禽传染性支气管炎冠状病毒[J]. 陈萍,王红宁,胡慧琼,黄勇,柳萍. 中国兽医杂志. 2007(07)
[5]鸡传染性支气管炎病毒血凝抑制试验研究[J]. 侯继波,何家惠,惠艳华,于漾,王秀花,邓碧华. 中国家禽. 2007(01)
[6]表达传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒的构建[J]. 田占成,孙永科,王云峰,智海东,刘胜旺,王玫,童光志. 中国预防兽医学报. 2006(04)
[7]鸡传染性支气管炎ELISA抗体检测试剂盒的研制[J]. 王君玮,尹燕博,刘清河,郭福生,孙淑芳,赵德明,王志亮. 中国动物检疫. 2004(03)
[8]利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究[J]. 王宏俊,陈福勇. 中国兽医杂志. 2003(09)
[9]鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达[J]. 黄亚东,郑青,李校堃,王林川,赵振芬,黄自然. 病毒学报. 2003(02)
[10]影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究[J]. 舒黛廉,赵余放,杨增歧,康佐文. 中兽医学杂志. 2003(03)
硕士论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒（M41株）血凝抑制试验抗原的研制及应用[D]. 张兵.中国兽医药品监察所 2008
[2]IBV分离株的生物学特性鉴定及其流行病学分析[D]. 吴培培.扬州大学 2008
[3]鸡传染性支气管炎血凝抑制（HI）试验的研究和应用[D]. 张建武.河南农业大学 2002
本文编号：3652323
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
符号说明
文献综述
第一章 检验传染性支气管炎病毒血凝抑制抗体方法的建立
1 材料
1.1 菌种和毒种
1.2 鸡胚、阳性血清和抗原
1.3 试剂
1.4 仪器及耗材
2 IBV HI试验抗原的制备
2.1 IBV的浓缩
2.2 A型产气荚膜梭菌上清的制备
2.3 不同酶处理IBV后HA效价的比较
2.4 IBV HA和HI试验标准操作步骤
2.5 IBV HI试验抗原的特异性检测
3 结果
4 讨论
第二章 IB-ND-IBD-EDS-AI五联灭活疫苗的研制
1 材料
1.1 疫苗和毒株
1.2 检测抗原和试剂盒
1.3 鸡胚和鸡
1.4 培养基和普通化学试剂
1.5 仪器
2 方法
2.1 IBV(LH株)种毒的鉴定
2.2 五联灭活疫苗的制备
2.3 五联灭活疫苗的质量检验
3 结果
4 讨论
全文总结
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]表达鸡传染性支气管炎病毒S基因的重组新城疫病毒构建[J]. 焦利红,葛金英,王琪,马文芝,步志高. 中国预防兽医学报. 2010(05)
[2]鸡传染性支气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LTJ95Ⅰ株病毒攻击的免疫保护[J]. 石星明,王玫,王云峰,杨桂花,孙鹏,李继松,曾伟伟,刘胜旺. 中国预防兽医学报. 2009(03)
[3]多表位疫苗的构建策略及其在动物疫苗中的应用[J]. 张有峰,王红宁,黄勇,阳泰. 中国农业科技导报. 2008(02)
[4]应用不连续密度梯度离心纯化禽传染性支气管炎冠状病毒[J]. 陈萍,王红宁,胡慧琼,黄勇,柳萍. 中国兽医杂志. 2007(07)
[5]鸡传染性支气管炎病毒血凝抑制试验研究[J]. 侯继波,何家惠,惠艳华,于漾,王秀花,邓碧华. 中国家禽. 2007(01)
[6]表达传染性支气管炎病毒S1基因重组鸡痘病毒的构建[J]. 田占成,孙永科,王云峰,智海东,刘胜旺,王玫,童光志. 中国预防兽医学报. 2006(04)
[7]鸡传染性支气管炎ELISA抗体检测试剂盒的研制[J]. 王君玮,尹燕博,刘清河,郭福生,孙淑芳,赵德明,王志亮. 中国动物检疫. 2004(03)
[8]利用IBV重组N蛋白建立ELISA抗体检测试剂盒的研究[J]. 王宏俊,陈福勇. 中国兽医杂志. 2003(09)
[9]鸡传染性支气管炎病毒H株纤突蛋白S1基因的克隆及其在毕赤酵母中表达[J]. 黄亚东,郑青,李校堃,王林川,赵振芬,黄自然. 病毒学报. 2003(02)
[10]影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究[J]. 舒黛廉,赵余放,杨增歧,康佐文. 中兽医学杂志. 2003(03)
硕士论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒（M41株）血凝抑制试验抗原的研制及应用[D]. 张兵.中国兽医药品监察所 2008
[2]IBV分离株的生物学特性鉴定及其流行病学分析[D]. 吴培培.扬州大学 2008
[3]鸡传染性支气管炎血凝抑制（HI）试验的研究和应用[D]. 张建武.河南农业大学 2002
本文编号：3652323
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