胶质细胞α 7-nAChR/PI3K/AKT通路在小鼠慢性睡眠剥夺中的炎性作用机制研究
发布时间：2024-02-21 02:25
目的:本研究旨在观察慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR蛋白和基因表达情况及α7-nAChR与星形胶质细胞和小胶质细胞的共表达情况,进而观察下游p-AKT、p-GSK、Nrf2、HO-1蛋白表达水平及炎性因子(TNF-α、IL-1β、IFN-γ、MCP-1)、抑炎因子(Arg-1、CD206、YM-1、TGF-β)基因表达水平,进一步探讨慢性睡眠剥夺后胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT通路的炎性作用机制,探讨睡眠剥夺后海马相关认知功能变化的可能机制。方法:C57BL/6J小鼠,成年7-8周龄,随机分为3组,每组12只。CC组(正常对照):适宜环境下饲养1周;SD组(慢性睡眠剥夺7d):适宜环境下饲养1周,利用改良多平台水环境法进行慢性睡眠剥夺7天;SD+PHA-543613组(慢性睡眠剥夺7d+PHA-543613):正常环境下饲养1周,利用改良多平台水环境法进行睡眠剥夺7天,睡眠剥夺结束后6小时腹腔注射α7-nAChR受体激动剂PHA-543613(6mg/kg),连续腹腔注射3天后处死。所有实验动物在处死之前保证12h光照(9:00-21:00),12h黑暗(21:0...
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语／符号说明Ⅹ
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
1 材料方法
1.1 实验动物
1.2 实验仪器
1.3 实验试剂
1.4 实验相关溶液的配制
1.5 实验方法
1.5.1 实验动物分组
1.5.2 慢性睡眠剥夺模型的建立
1.5.3 脑组织取材
1.5.4 蛋白免疫印迹分析(Western-Blot)
1.5.5 免疫荧光染色
1.5.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
1.6 统计学方法
2 结果
2.1 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR的影响
2.1.1 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR蛋白表达的影响
2.1.2 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChRmRNA表达水平的影响
2.1.3 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR阳性细胞及与胶质细胞共表达的影响
2.2 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织PIK3/AKT/GSK下游p-AKT、p-GSK蛋白表达的影响
2.3 腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR及与胶质细胞共表达情况的影响
2.3.1 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR蛋白、mRNA表达的影响
2.3.2 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR与胶质细胞共表达情况的影响
2.4 腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织PIK3/AKT/GSK相关指标的影响
2.4.1 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织p-AKT、p-GSK的蛋白表达水平的影响
2.4.2 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织抗氧化酶Nrf-2、HO-1的蛋白表达水平的影响
2.4.3 慢性睡眠剥夺后腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织炎性因子及抑炎因子mRNA表达水平的影响
3 讨论
3.1 慢性睡眠剥夺与α7-nAChR
3.1.1 慢性睡眠剥夺
3.1.2 慢性睡眠剥夺使小鼠海马区α7-nAChR的蛋白及基因表达下降.
3.1.3 慢性睡眠剥夺激活小鼠海马区胶质细胞并抑制胶质细胞与α 7-nAChR的共表达
3.2 慢性睡眠剥夺与胶质细胞α7-nAChR及PI3K/AKT/GSK-3β信号通路
3.2.1 PI3K/AKT/GSK-3β信号通路
3.2.2 慢性睡眠剥夺抑制海马区胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路
3.3 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT信号传导通路参与介导抗炎、抗氧化反应
3.3.1 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT调控抗氧化酶Nrf2和HO-1的表达
3.3.2 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT调节胶质细胞炎性因子和抑炎因子的表达和释放
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 α7-nAChR对中枢神经系统疾病的影响机制的研究进展
综述参考文献
致谢
个人简历
本文编号：3904898
【文章页数】：94 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语／符号说明Ⅹ
前言
研究现状、成果
研究目的、方法
1 材料方法
1.1 实验动物
1.2 实验仪器
1.3 实验试剂
1.4 实验相关溶液的配制
1.5 实验方法
1.5.1 实验动物分组
1.5.2 慢性睡眠剥夺模型的建立
1.5.3 脑组织取材
1.5.4 蛋白免疫印迹分析(Western-Blot)
1.5.5 免疫荧光染色
1.5.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
1.6 统计学方法
2 结果
2.1 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR的影响
2.1.1 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR蛋白表达的影响
2.1.2 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChRmRNA表达水平的影响
2.1.3 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织α7-nAChR阳性细胞及与胶质细胞共表达的影响
2.2 慢性睡眠剥夺对小鼠海马组织PIK3/AKT/GSK下游p-AKT、p-GSK蛋白表达的影响
2.3 腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR及与胶质细胞共表达情况的影响
2.3.1 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR蛋白、mRNA表达的影响
2.3.2 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织α7-nAChR与胶质细胞共表达情况的影响
2.4 腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织PIK3/AKT/GSK相关指标的影响
2.4.1 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织p-AKT、p-GSK的蛋白表达水平的影响
2.4.2 慢性睡眠剥夺后腹腔注射PHA-543613对小鼠海马组织抗氧化酶Nrf-2、HO-1的蛋白表达水平的影响
2.4.3 慢性睡眠剥夺后腹腔注射α7-nAChR激动剂PHA-543613对小鼠海马组织炎性因子及抑炎因子mRNA表达水平的影响
3 讨论
3.1 慢性睡眠剥夺与α7-nAChR
3.1.1 慢性睡眠剥夺
3.1.2 慢性睡眠剥夺使小鼠海马区α7-nAChR的蛋白及基因表达下降.
3.1.3 慢性睡眠剥夺激活小鼠海马区胶质细胞并抑制胶质细胞与α 7-nAChR的共表达
3.2 慢性睡眠剥夺与胶质细胞α7-nAChR及PI3K/AKT/GSK-3β信号通路
3.2.1 PI3K/AKT/GSK-3β信号通路
3.2.2 慢性睡眠剥夺抑制海马区胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT/GSK-3β通路
3.3 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT信号传导通路参与介导抗炎、抗氧化反应
3.3.1 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT调控抗氧化酶Nrf2和HO-1的表达
3.3.2 慢性睡眠剥夺中胶质细胞α7-nAChR/PI3K/AKT调节胶质细胞炎性因子和抑炎因子的表达和释放
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 α7-nAChR对中枢神经系统疾病的影响机制的研究进展
综述参考文献
致谢
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本文编号：3904898
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