沙棘果解剖特征及Vc合成中关键酶活性研究

发布时间：2020-08-02 19:17

【摘要】：中国沙棘(Hippophae rhamnoides L.subsp.sinensis Rousi)属于胡颓子科(Elaeagnaceae)沙棘属(Hippophae)植物,其果实具有丰富的天然活性成分,有较高的食用、药用价值,其中维生素C的含量极高,被称为维生素C之王‖。近年来,人们对于沙棘果的功能、成分研究较多,对于沙棘果的不同时期的形态解剖结构及其维生素C合成过程中关键酶研究较少,所以本研究以沙棘果为材料,对沙棘果的形态解剖结构、沙棘果维生素C合成过程中关键酶的活性以及沙棘果维生素C的含量进行了相应的研究。主要研究内容与结果如下:本研究以不同时期的沙棘果为原料,使用石蜡切片法对沙棘果进行处理,通过光学显微镜进行观察,探讨沙棘果发育过程中形态解剖结构的变化,发现沙棘果表面具有表皮毛,以盾状毛居多,沙棘果成熟后表皮毛脱落;中果皮是隐头花序多汁果肉部分,中果皮中含有椭圆形的着橙色的微粒内含物的异细胞,在子房膨大初期开始一直积累到沙棘果实完全成熟;内果皮由几层个体较小的扁平细胞组成,形状不规则,与外果皮细胞相似,内果皮细胞间紧密镶嵌连接,与种子的外种皮一般相隔开,不连接,是区分开果皮和种子的标志。使用酶标仪对不同月份的杂优1号、杂优2号、杂优10号、杂优12号、中国沙棘果维生素C合成过程中关键酶:GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMPase)、GDP-L-半乳糖磷酸酶(GGP)、L-半乳糖-1-磷酸酶(GPP)、L-半乳糖-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)、醛糖糖酸内酯酶(AAL)的活性进行测定,分析这几种关键酶的活性,发现各种酶随着沙棘果的生长发育基本呈现升高-降低-升高‖的趋势,与沙棘果维生素C含量的变化趋势基本相同,各品种沙棘果维生素C合成过程中杂优12号整体酶的活性较高,中国沙棘果整体酶的活性较低,推测杂优12号沙棘果合成维生素C的能力最强。这为维生素C的大量合成与开发提供参考,为维生素C在分子领域的应用奠定理论基础。采用高效液相色谱法对不同时期的杂优12号及中国沙棘果中维生素C的含量进行测定,发现该方法准确度高、一致性好,可适用于沙棘果维生素C的含量测定和质量控制。此外,杂优12号沙棘果发育过程中维生素C的含量高于中国沙棘果,且这两种沙棘果维生素C的含量也基本满足升高-降低-升高‖的变化趋势,在这两种沙棘果的近熟期维生素C含量最高,为沙棘果的采摘时间、品种的选育提供理论根据。
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S793.6
【图文】：

维生素C合成,高等植物,半乳糖,途径

5图 1.1 高等植物中维生素 C 合成的 L-半乳糖途径Fig1.1 L-galactose pathway of Synthesis of vitamin C in higher plants

糖醛酸,维生素C合成,高等植物,古洛糖

图 1.2 高等植物中维生素 C 合成的糖醛酸转变途径Fig1.2 The conversion of uronic acids of Synthesis of vitamin C in higher plants1.2.2.1.3 古洛糖途径（Gulose pathway）

标准曲线,焦磷酸化酶,甘露糖,吸光值

图 3.2 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶活性与吸光值的线性关系The linear relationship between the activity of GDP-mannose pyrophosphorylase aabsorption value不同品种不同月份沙棘果 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMPase)酶活的酶标仪在波长 450nm 下，测定不同品种、不同月份的 GDP-D-甘吸光度（OD 值），通过标准曲线得出样品中 GDP-D-甘露糖焦磷酸 3.1 所示。表 3.1 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶活性（单位：U/L）Table3.1 The activity of GDP-mannose pyrophosphorylase（Unit：U/L）4月 20号 5月 10号 5月 30号 6月 19号 7 月 9 号 7月 29号 840.46 49.21 39.27 40.86 50.01 45.24 52.39 47.22 38.87 44.44 42.45 40.46 39.27 40.86 50.01 45.24 60.35 58.76

【参考文献】