红松体胚成熟培养与胚性愈伤组织保存研究

发布时间：2023-11-12 12:18

　　红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.),作为阔叶红松林的建群种,是我国东北东部山区极其重要的珍贵乡土优质用材林和坚果经济林树种。本研究通过筛选和建立胚性愈伤组织超低温保存方案,进一步优化红松体胚发生体系,同时对不同类型愈伤组织和红松体胚不同发育时期的形态及生理进行探究,以阐述红松体胚发生与外源添加物质的关系,揭示不同类型愈伤组织之间的形态和生理与体胚发生潜力之间、体胚发育与形态和生理变化之间的关系。主要结果如下:(1)在红松胚性愈伤组织诱导过程中,外植体母树来源显著影响胚性愈伤组织诱导率,28株母树中只有10株母树成功获得胚性愈伤组织,诱导率最高为22%,最低为2%。意味着基因型在胚性愈伤组织诱导中可能起到决定性作用。(2)在红松体胚成熟培养过程中,最佳培养方式为分散培养(91个·g-1FW愈伤组织),最佳成熟培养基为mLV+80 μmol·L-1 ABA+1.2%结冷胶+0.2 mol·L-1蔗糖,最佳细胞密度为50 mg愈伤组织每皿。其中,0.2 mol·L-1蔗糖处理对促进体胚发生数量影响最大(9.3倍),1.2%结冷胶处理对促进体胚发生数量影响次之...

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 植物体细胞胚胎发生研究现状
        1.1.1 针叶树体胚发生研究
        1.1.2 体胚发生中的生理生化研究
    1.2 植物种植资源保存研究现状
    1.3 红松体胚发生研究进展
    1.4 本研究的目的与意义
2 红松体胚发生体系优化
    2.1 试验材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 试验方法
    2.2 数据统计与分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 母树来源对胚性愈伤组织诱导的影响
        2.3.2 体胚成熟培养方式对体胚成熟数量的影响
        2.3.3 培养基类型对体胚成熟数量的影响
        2.3.4 ABA浓度对体胚成熟数量的影响
        2.3.5 结冷胶浓度对体胚成熟数量的影响
        2.3.6 蔗糖浓度和细胞密度对体胚成熟数量的影响
        2.3.7 胚性愈伤组织继代时间对体胚成熟数量的影响
        2.3.8 红松体胚苗萌发和再生植株移栽
    2.4 讨论
        2.4.1 母树来源与胚性愈伤组织诱导的关系
        2.4.2 成熟培养方式与体胚成熟数量的关系
        2.4.3 培养基类型与体胚成熟数量的关系
        2.4.4 ABA和结冷胶浓度与体胚成熟数量的关系
        2.4.5 蔗糖浓度和细胞密度与体胚成熟数量的关系
        2.4.6 胚性愈伤组织继代培养时间与体胚成熟数量的关系
    2.5 本章小结
3 不同发育时期红松体胚形态变化及生化分析
    3.1 试验材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验方法
    3.2 数据统计与分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 红松体胚发育过程中的形态变化
        3.3.2 红松体胚发育过程中生化分析
    3.4 讨论
        3.4.1 红松体胚发育过程培养物鲜重、干重比和含水量与体胚发育的关系
        3.4.2 贮藏物质与红松体胚发育的关系
        3.4.3 抗氧化酶活性与红松体胚发育的关系
    3.5 本章小结
4 红松不同类型愈伤组织的形态及生化差异
    4.1 试验材料和方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
    4.2 数据统计与分析
    4.3 结果与分析
        4.3.1 不同类型愈伤组织的形态与细胞差异
        4.3.2 不同类型愈伤组织的生理分析
    4.4 讨论
        4.4.1 不同类型愈伤组织的形态差异与体胚发生潜力的关系
        4.4.2 不同类型愈伤组织的生理生化差异与体胚发生潜力的关系
    4.5 本章小结
5 红松胚性愈伤组织超低温保存研究
    5.1 试验材料与方法
        5.1.1 试验材料
        5.1.2 试验方法
    5.2 数据统计与分析
    5.3 结果与分析
        5.3.1 预培养条件对胚性愈伤组织存活率的影响
        5.3.2 冷冻保护剂对细胞存活率的影响
        5.3.3 胚性愈伤组织复苏观察
    5.4 讨论
    5.5 本章小结
结论
参考文献
附录Ⅰ
附录Ⅱ
附录Ⅲ
附录Ⅳ
附录Ⅴ
附录Ⅵ
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
附件



本文编号：3863140