新疆林木腐烂病菌种类鉴定及其主要种Valsa mali遗传分化和初侵染源快速检测研究
发布时间：2023-11-15 17:32
目的:为了明确新疆防护林和经济林上腐烂病菌的种类,并了解主要种Valsa mali的致病力分化及遗传多样性情况,以确定该菌能否在不同林木寄主上相互侵染和传播,同时采用分子检测技术确定腐烂病菌在新疆苹果园和香梨园的初次侵染来源。最终为新疆林木腐烂病的防治提供理论和技术支持。方法:从17种新疆常见的农田防护林和果树上采集林木腐烂病病样,采用常规组织分离法对样品进行分离,通过接种离体枝条试验测定各分离株的致病性;采用形态学与ITS、β-Tubulin序列分析相结合的方法,对新疆林木腐烂病菌种类进行鉴定;采用离体枝条接种法和ISSR方法对新疆林木腐烂病主要种Valsa mali的致病性分化和遗传多样性进行研究;针对4种已报道的林木腐烂病菌的β-Tubulin基因设计种特异性引物,对苹果园与香梨园中林木腐烂病菌的存在状况进行快速检测。结果:1、从新疆17种林木寄主植物分离得到281个腐烂病菌株,分离菌株全为无性型。通过形态学特征、ITS序列、β-Tubulin基因序列将这些分离株鉴定为5个种,分别为:Valsa mali(无性型:Cytospora mali)、Valsa sordida(无性型...
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 林木主要病虫害及其影响
1.1.1 新疆林业发展现状
1.1.2 林木病虫害种类及其影响
1.1.3 林木腐烂病的发生和危害
1.1.4 林果腐烂病发生规律
1.1.5 林木腐烂病的防治
1.2 林木腐烂病菌分类
1.2.1 形态学分类
1.2.2 分子生物学分类
1.3 腐烂病菌致病力差异研究
1.4 腐烂病菌遗传多样性研究
1.4.1 遗传多样性研究意义
1.4.2 遗传多样性研究方法和技术
1.5 腐烂病菌初侵染源检测
1.6 本研究的目的和意义
1.6.1 研究意义
1.6.2 技术路线
第二章 新疆主要林木腐烂病菌鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 新疆不同林木寄主种类及分离病菌数量统计
2.2.2 防护林腐烂病病原菌分离培养结果
2.2.3 经济林腐烂病病原菌分离鉴定结果
2.2.4 致病性测定结果
2.2.5 腐烂病菌不同种形态学特征
2.2.6 代表菌株分子生物学鉴定
2.3 讨论与结论
2.3.1 讨论
2.3.2 结论
第三章 新疆林木腐烂病菌主要种V.mali致病力分化研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果与分析
3.2.1 不同来源V.mali培养性状观察
3.2.2 最适pH测定
3.2.3 最适温度测定
3.2.4 不同寄主来源V.mali在苹果、香梨致病性测定
3.2.5 同一寄主来源腐烂病菌V.mali在不同林木寄主上致病性测定
3.3 讨论与结论
3.3.1 讨论
3.3.2 结论
第四章 新疆林木腐烂病主要种V.maliISSR遗传分析
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.1.2.1 试验菌株菌丝体获得
4.1.2.2 DNA提取
4.1.2.3 试验引物
4.1.2.4 ISSR-PCR反应体系及程序
4.1.2.5 数据统计和分析
4.2 结果与结论
4.2.1 不同来源苹果树腐烂病V.maliISSRPCR结果
4.2.2 V.mali的不同地理区域种群的群体遗传分析
4.2.3 V.mali不同地理区域种群的群体遗传结构与分化
4.2.4 苹果腐烂病V.mali的聚类分析
4.3 讨论与结论
4.3.1 讨论
4.3.2 结论
第五章 林木腐烂病菌快速分子检测方法研究
5.1 材料和方法
5.1.1 供试菌株
5.1.2 DNA提取及PCR扩增
5.1.3 特异性引物设计
5.1.4 特异性引物的特异性检测
5.1.5 特异性引物灵敏度检测
5.2 结果与分析
5.2.1 特异性引物的设计
5.2.2 特异性引物的检测
5.2.3 特异性引物灵敏度检测
5.3 讨论与结论
5.3.1 讨论
5.3.2 结论
第六章 新疆苹果园及香梨园腐烂病菌初侵染源检测
6.1 材料与方法
6.1.1 材料
6.1.2 方法
6.2 结果与分析
6.2.1 林果植物材料和土壤样品DNA提取
6.2.2 库尔勒香梨园腐烂病初侵染源检测
6.2.3 阿克苏苹果园腐烂病初侵染源检测
6.3 讨论与结论
6.3.1 讨论
6.3.2 结论
第七章 全文总结
7.1 结论
7.1.1 新疆主要林木腐烂病病原菌种类鉴定
7.1.2 新疆林果腐烂病菌主要种V.mali致病性分化研究
7.1.3 新疆林木腐烂病菌主要种V.maliISSR遗传分化
7.1.4 林木腐烂病菌快速分子检测方法建立
7.1.5 新疆林木腐烂病初侵染源检测
7.2 特色和创新
7.2.1 研究特色
7.2.2 研究创新
7.3 存在问题
参考文献
附图1 新疆林果腐烂病的危害症状
附图2 腐烂病菌V.mali致病性分化
致谢
作者简介
石河子大学博士研究生学位论文导师评阅表
本文编号：3864184
【文章页数】：113 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1.1 林木主要病虫害及其影响
1.1.1 新疆林业发展现状
1.1.2 林木病虫害种类及其影响
1.1.3 林木腐烂病的发生和危害
1.1.4 林果腐烂病发生规律
1.1.5 林木腐烂病的防治
1.2 林木腐烂病菌分类
1.2.1 形态学分类
1.2.2 分子生物学分类
1.3 腐烂病菌致病力差异研究
1.4 腐烂病菌遗传多样性研究
1.4.1 遗传多样性研究意义
1.4.2 遗传多样性研究方法和技术
1.5 腐烂病菌初侵染源检测
1.6 本研究的目的和意义
1.6.1 研究意义
1.6.2 技术路线
第二章 新疆主要林木腐烂病菌鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 新疆不同林木寄主种类及分离病菌数量统计
2.2.2 防护林腐烂病病原菌分离培养结果
2.2.3 经济林腐烂病病原菌分离鉴定结果
2.2.4 致病性测定结果
2.2.5 腐烂病菌不同种形态学特征
2.2.6 代表菌株分子生物学鉴定
2.3 讨论与结论
2.3.1 讨论
2.3.2 结论
第三章 新疆林木腐烂病菌主要种V.mali致病力分化研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果与分析
3.2.1 不同来源V.mali培养性状观察
3.2.2 最适pH测定
3.2.3 最适温度测定
3.2.4 不同寄主来源V.mali在苹果、香梨致病性测定
3.2.5 同一寄主来源腐烂病菌V.mali在不同林木寄主上致病性测定
3.3 讨论与结论
3.3.1 讨论
3.3.2 结论
第四章 新疆林木腐烂病主要种V.maliISSR遗传分析
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.1.2.1 试验菌株菌丝体获得
4.1.2.2 DNA提取
4.1.2.3 试验引物
4.1.2.4 ISSR-PCR反应体系及程序
4.1.2.5 数据统计和分析
4.2 结果与结论
4.2.1 不同来源苹果树腐烂病V.maliISSRPCR结果
4.2.2 V.mali的不同地理区域种群的群体遗传分析
4.2.3 V.mali不同地理区域种群的群体遗传结构与分化
4.2.4 苹果腐烂病V.mali的聚类分析
4.3 讨论与结论
4.3.1 讨论
4.3.2 结论
第五章 林木腐烂病菌快速分子检测方法研究
5.1 材料和方法
5.1.1 供试菌株
5.1.2 DNA提取及PCR扩增
5.1.3 特异性引物设计
5.1.4 特异性引物的特异性检测
5.1.5 特异性引物灵敏度检测
5.2 结果与分析
5.2.1 特异性引物的设计
5.2.2 特异性引物的检测
5.2.3 特异性引物灵敏度检测
5.3 讨论与结论
5.3.1 讨论
5.3.2 结论
第六章 新疆苹果园及香梨园腐烂病菌初侵染源检测
6.1 材料与方法
6.1.1 材料
6.1.2 方法
6.2 结果与分析
6.2.1 林果植物材料和土壤样品DNA提取
6.2.2 库尔勒香梨园腐烂病初侵染源检测
6.2.3 阿克苏苹果园腐烂病初侵染源检测
6.3 讨论与结论
6.3.1 讨论
6.3.2 结论
第七章 全文总结
7.1 结论
7.1.1 新疆主要林木腐烂病病原菌种类鉴定
7.1.2 新疆林果腐烂病菌主要种V.mali致病性分化研究
7.1.3 新疆林木腐烂病菌主要种V.maliISSR遗传分化
7.1.4 林木腐烂病菌快速分子检测方法建立
7.1.5 新疆林木腐烂病初侵染源检测
7.2 特色和创新
7.2.1 研究特色
7.2.2 研究创新
7.3 存在问题
参考文献
附图1 新疆林果腐烂病的危害症状
附图2 腐烂病菌V.mali致病性分化
致谢
作者简介
石河子大学博士研究生学位论文导师评阅表
本文编号：3864184
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/lylw/3864184.html