小黑杨PnAlaAT基因的克隆及遗传转化

发布时间：2024-05-18 02:28

　　小黑杨(Populus simonii ×Populus nigra)是杨柳科杨属乔木,具有抗旱、耐寒、耐瘠薄等优良性状,是北方推广的造林树种。丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase,AlaAT)是一种磷酸吡哆醛依赖性的转移酶,在植物碳氮代谢平衡中起关键性作用。本研究利用生物信息学方法,在杨树基因组数据库中鉴定了谷丙转氨酶基因家族的4个同源基因。以小黑杨为试材克隆了PnAlaAT1-4基因,并且对获得的cDNA的核苷酸序列、编码蛋白的氨基酸序列进行了生物信息学分析。同时,利用实时定量PCR方法鉴定了PnAlaATs基因的组织表达特异性及其在不同氮素条件、日节律及光照等条件下的表达模式。构建pROK Ⅱ-PnAlaAT3植物表达载体后通过农杆菌介导法遗传转化小黑杨,获得了 17个转基因株系。主要研究结果如下:(1)利用生物信息学方法,在毛果杨基因组数据库中鉴定了 AlaAT基因家族的4个成员。系统进化树分析表明,该家族含有2个亚家族,PtAlaAT3和PtAlaAT4属于亚家族A,编码谷丙转氨酶;PtAlaAT1和PtAlaAT2属于亚家族B,编码谷氨酸:乙醛...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１植物对氮素的吸收和同化??ＮＲ：硝酸还原酶；ＧＯＧＡＴ：谷氨酰胺合成酶；ｇｌｕｔａｍａｔｅ：谷氨酰胺；ｇｌｕｔａｍｉｎｅ：谷氨酸盐

?１绪论???１绪论??１．１植物氮素代谢过程??氮素是植物从土壤中吸收量最多的元素，是植物生长发育过程中必需的大量元素。??氮素的吸收与利用效率直接影响着植物的生长与发育。??可以被植物从外界吸收和利用的氮素形式主要是铵态氮、硝态氮、亚硝态氮、单质??态氮及一些可溶性有机含氮化....

图２－２毛果杨基因的结构??

?东北林业人学硕＿丨：学位论文???２．３．３杨树乃基因的结构分析??通过ＧＳＤＳ在线软件绘制毛果杨基因的结构图，结果如图２－２所示，亚家??族Ａ中的ＰＭＷ７７和基因具有相似的基因结构，都含有１３个外显子，均为??第３至最后一个外显子编码了保守结构域。亚家族Ｂ中的尸Ｍ／ａｄｒｉ和....

图２－３毛果杨ＰＭ／ｄ７：ｖ基因启动子的顺式作用元件示意图??注：ＡＢＡ?ｅｌｅｍｅｎｔ，脱落酸应答兀件；Ｌｉｇｈｔ?ｅｌｅｍｅｎｔ，光应答元件；ＭｅＪＡ?ｅｌｅｍｅｎｔ，茉莉酸应答元??

?东北林业人学硕＿丨：学位论文???２．３．３杨树乃基因的结构分析??通过ＧＳＤＳ在线软件绘制毛果杨基因的结构图，结果如图２－２所示，亚家??族Ａ中的ＰＭＷ７７和基因具有相似的基因结构，都含有１３个外显子，均为??第３至最后一个外显子编码了保守结构域。亚家族Ｂ中的尸Ｍ／ａｄｒｉ和....

图３－１小黑杨取材与氮素处理设计模式图??（３）光和黑暗处理：培养方式如（１），小黑杨株高近３０?ｃｍ时，进行光照和黑暗??处理，每三棵苗一组

１０?ｍｍｏｌ／Ｌ?ｌ?ｉ２ｈ?｜??１?ＨＨＨＩ????ｉ?ｌｉｂ?＼??＼＼?ｔ?３ｈ?）??？?Ｊ隊：?０．１?ｍｍｏｌ／Ｌ??▲?、???６?７２ｂ?＼??Ｍｇ：?Ｉ?？?＼??ｗＢｆ?Ｒｏｏｔ?ＮＨ＾ＮＯｖ?１?ｍｍｏｌ／Ｌ?Ｌ１??Ｖｉ?ｎ?ｏｒｎ??ｉ?＾?Ｉ?１０....

本文编号：3976320