豌豆根瘤菌RND外排转运基因tpaA的功能研究

发布时间：2024-02-26 03:41

　　Rhizobium. leguminosarum 3841 tpa A基因编码RND家族内膜外排转运蛋白,RND外排泵的过量表达是革兰阴性菌细菌抗生素耐药性形成的重要原因之一.采用基因同源重组构建豌豆根瘤菌tpa A基因突变株RLtpa A,并研究了该基因突变对根瘤菌生长、抗生素耐药性以及共生固氮的影响.结果表明,tpa A基因突变会使根瘤菌在AMS基本培养基生长延迟,但不影响其在TY天然培养基中的正常生长. tpa A基因突变可能抑制了根瘤菌中的RND家族外排泵的过量表达,从而使其抗生素耐药性降低.接种了tpa A基因突变株的豌豆植株能形成红色有效根瘤,但其接种根瘤固氮酶活性降低.实时荧光定量RT-PCR分析表明tpa A基因在根瘤类菌体中的表达显著上调.

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 菌株质粒和培养基
    1.2 主要试剂
    1.3 R.leguminosarum tpa A突变体的构建
    1.4 菌株生长实验
    1.5 抗生素抗性实验
    1.6 接种植株共生固氮酶活的测定
    1.7 qRT-PCR分析tpa A基因在根瘤中的表达
2 结果与分析
    2.1 豌豆根瘤菌3841 tpa A生物信息学分析
    2.2 豌豆根瘤菌tpa A突变菌株的构建
    2.3 tpa A基因突变对菌株生长的影响
    2.4 tpa A基因突变对根瘤菌抗生素抗性的影响
    2.5 豌豆盆栽实验
    2.6 tpa A基因在根瘤类菌体中的表达
3 讨论



本文编号：3911277