抑杀杂交鳢源舒伯特气单胞菌的中草药筛选与应用

发布时间：2020-04-23 04:07

【摘要】：近年来,随着高密度养殖杂交鳢(Channa maculata♀×C.argus♂)技术的推广,致使养殖水体水质较差,病害频频发生,制约其可持续健康发展。其中,舒伯特气单胞菌(Aeromonas schubertii)所引起的内脏类结节病是鳢科鱼类常见疾病之一。中草药作为在水产养殖中常用的药物,不仅在我国具有历史悠久、资源丰富、毒副作用小、无残留等优势,而且具有抗菌、增强免疫等作用。因此,利用中草药提高鱼体的免疫力,减少病害发生是维持杂交鳢养殖业可持续发展的重要举措。试验一选取五倍子、黄柏、乌梅等60味中草药作为原料,采用水提法,制成浓度为1g/m L的药液,采用琼脂扩散法和二倍稀释法,利用来自患病杂交鳢体内分离出的的舒伯特气单胞菌进行体外抑菌试验,以抑菌圈直径和MIC作为评价指标,筛选出抑菌效果较好的中草药。试验结果表明,初步筛选出了五倍子、大黄、黄柏、黄连、地榆、丁香、木瓜、诃子、五味子、儿茶、乌梅11味中草药对舒伯特气单胞菌抑菌较好的抑菌效果;通过二次筛选,确定以初步筛选出的五倍子、大黄、乌梅等11味中草药进行组方试验研究。试验二采用正交t值法进行试验设计,将初步筛选出的乌梅等11味中草药进行配伍,以琼脂扩散法测出的抑菌圈直径为评价指标,经主药筛选、辅药交互作用和剂量选择三个步骤,筛选出的复方中草药由乌梅和木瓜按一定的比例组成;并以急性毒性试验对该复方进行安全性评价,以杂交鳢为试验对象,结果表明,复方中草药制剂的半致死浓度LD50≥8×105mg/L,依据急性毒性(LD50)剂量分级表可判定所选中草药制剂为无毒物,属安全制剂。试验三、四选用初始体重(22.42±0.99)g,体长(15.45±1.02)cm的杂交鳢为试验对象,随机分为8组,每组30尾,每组设3个重复。将单方乌梅和复方中草药分别以0.5%、1.0%、2.0%剂量加入到基础饲料中,以基础饲料和1%木瓜添加量的饲料为对照,饲喂60d后,分别测定增重率、特定生长率、丰满度、内脏比等生长指标、形体指标和内脏指数,以研究单方和复方中草药对杂交鳢生长性能的影响。结果表明,饲喂试验饲料60d后,随着复方添加量的增大,平均末体重、绝对增重量、增重率和特定生长率出现缓慢降低的趋势,最大值均出现在0.5%复方添加组,分别比基础饲料组增加了14.93%、20.92%、22.46%、11.47%。同时,测定肝脏、肌肉、血清中SOD、MDA、CAT、ACP和AKP的活性,以研究单方和复方中草药对杂交鳢非特异性免疫功能的影响。结果表明,各添加组之间形体指数差异不显著,而脾脏指数的最大值出现在2%乌梅添加组,比基础饲料组增加了47.83%。各添加组血清、肝脏和肌肉组织中的SOD活性与对照组相比,均有不同程度的提高,其中,1%乌梅添加量对肝脏和血清SOD影响最大,2%复方添加量对肌肉SOD影响最大;各添加组血清、肝脏和肌肉组织中的MDA含量与对照组相比,均有不同程度的降低,其中,1%乌梅添加量对肝脏MDA影响最大,0.5%复方、2%乌梅添加组肌肉中的MDA含量最低,2%乌梅添加组血清中MDA含量最低;0.5%、1%、2%复方和2%乌梅添加组与基础饲料组相比,CAT活性均有明显提高现象,其中2%乌梅添加组对肝脏和血清中CAT活性的影响最大,2%复方添加组对肌肉中CAT活性的影响最大;各添加组血清、肝脏和肌肉组织中的ACP和AKP活性与对照组相比,没有太大的变化。综合上述试验结果,可以表明,0.5%复方添加量对杂交鳢的生长有明显促进作用;2%乌梅添加量能显著影响杂交鳢非特异性免疫功能。
【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S943

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