华南地区鱼类病原哈维氏弧菌分型及其防治策略研究
发布时间：2024-01-30 06:10
2011年5月～2013年10月,对海南、广东、广西等华南地区的主要海水养殖系统的斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)、红鳍笛鲷(Lutjanus erythopterus)、褐点石斑鱼(E. fuscoguttatus)和珍珠龙胆(棕点石斑鱼E. fuscoguttatus♀×鞍带石斑鱼E.lanceolatus♂)等多种海水鱼类的弧菌病开展了流行病学调查,共分离获得63株弧菌,其中,哈维氏弧菌(Vibrio harcveyi)43株、溶藻弧菌(V. alginolyticus)7株、副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)5株、轮虫弧菌(V. rotiferianus)2株、需钠弧菌(V.natriegens)1株、无法确定的弧菌属(Uncultured Vibrios)其它种细菌5株；当水体盐度为30时,18株哈维氏弧菌、1株溶藻弧菌、1株轮虫弧菌、1株无法确定的弧菌属其它种细菌均可使斜带石斑鱼致病,其中GDH11385、GDH11387、GDH12388、GDH13389为强毒株(感染24h内出现发病死亡),LD50值分别为4.06×102CFU/...
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
1. 弧菌及弧菌病的研究进展
1.1 弧菌的基本特征
1.2 海洋中的弧菌分布
1.3 弧菌病的研究进展
1.4 弧菌的鉴定方法
1.4.1 生理生化鉴定法
1.4.2 基因鉴定法
2 哈维氏弧菌及其毒力的研究进展
2.1 哈维氏弧菌的分类地位及分布情况
2.2 哈维氏弧菌的生物学特性
2.3 哈维氏弧菌及其流行病学研究
2.4 哈维氏弧菌鉴定及其分型方法研究
2.5 哈维氏弧菌的致病机理
2.6 哈维氏弧菌病的防治研究
3 本研究的目的及意义
第二章 华南地区海水养殖鱼类哈维氏弧菌的分离及分型
1 引言
2 实验材料
2.1 实验菌株
2.2 实验动物
2.3 实验仪器
2.4 实验试剂
3 实验方法
3.1 流行病学调查及病原菌的分离
3.2 病原菌确定
3.3 强毒株LD50值的测定
3.4 分离菌株的分子鉴定
3.4.1 分离菌株基因组DNA的提取
3.4.2 16SrDNA、topA和mreB基因序列分子生物学鉴定
3.4.3 强毒株的rpoA和pyrH序列分析
3.5 表型鉴定
3.6 抗菌药物敏感性试验
3.7 溶血性试验
3.8 胞外蛋白酶活性测定
4 结果
4.1 流行病学调查及病原菌分离
4.2 病原菌确定
4.3 强毒株LD50值的测定
4.4 病原菌的分子鉴定
4.5 表型鉴定
4.6 抗菌药物敏感性测定
4.7 溶血性试验
4.8 胞外蛋白酶测定
5 讨论
第三章 哈维氏弧菌病防治策略的探索性研究
1 引言
2 实验材料
2.1 实验菌株
2.2 实验动物
2.3 实验试剂和仪器
2.3.1 主要实验仪器
2.3.2 主要实验试剂
3 方法
3.1 不同盐度下GDH11385毒力测定
3.1.1 斜带石斑鱼的暂养
3.1.2 人工感染试验
3.1.3 水体中菌体含量的监测
3.2 无毒菌株免疫保护力的测定
3.2.1 斜带石斑鱼的暂养
3.2.2 无毒哈维氏菌株菌液的制备
3.2.3 无毒株的接种
3.2.4 人工感染
4 结果
4.1 不同盐度浸泡感染
4.1.1 人工感染
4.1.2 水体中菌体含量的监测
4.2 无毒菌株免疫保护力的测定
5 讨论
结论
参考文献
作者在读期间发表论文情况
致谢
本文编号：3889657
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
1. 弧菌及弧菌病的研究进展
1.1 弧菌的基本特征
1.2 海洋中的弧菌分布
1.3 弧菌病的研究进展
1.4 弧菌的鉴定方法
1.4.1 生理生化鉴定法
1.4.2 基因鉴定法
2 哈维氏弧菌及其毒力的研究进展
2.1 哈维氏弧菌的分类地位及分布情况
2.2 哈维氏弧菌的生物学特性
2.3 哈维氏弧菌及其流行病学研究
2.4 哈维氏弧菌鉴定及其分型方法研究
2.5 哈维氏弧菌的致病机理
2.6 哈维氏弧菌病的防治研究
3 本研究的目的及意义
第二章 华南地区海水养殖鱼类哈维氏弧菌的分离及分型
1 引言
2 实验材料
2.1 实验菌株
2.2 实验动物
2.3 实验仪器
2.4 实验试剂
3 实验方法
3.1 流行病学调查及病原菌的分离
3.2 病原菌确定
3.3 强毒株LD50值的测定
3.4 分离菌株的分子鉴定
3.4.1 分离菌株基因组DNA的提取
3.4.2 16SrDNA、topA和mreB基因序列分子生物学鉴定
3.4.3 强毒株的rpoA和pyrH序列分析
3.5 表型鉴定
3.6 抗菌药物敏感性试验
3.7 溶血性试验
3.8 胞外蛋白酶活性测定
4 结果
4.1 流行病学调查及病原菌分离
4.2 病原菌确定
4.3 强毒株LD50值的测定
4.4 病原菌的分子鉴定
4.5 表型鉴定
4.6 抗菌药物敏感性测定
4.7 溶血性试验
4.8 胞外蛋白酶测定
5 讨论
第三章 哈维氏弧菌病防治策略的探索性研究
1 引言
2 实验材料
2.1 实验菌株
2.2 实验动物
2.3 实验试剂和仪器
2.3.1 主要实验仪器
2.3.2 主要实验试剂
3 方法
3.1 不同盐度下GDH11385毒力测定
3.1.1 斜带石斑鱼的暂养
3.1.2 人工感染试验
3.1.3 水体中菌体含量的监测
3.2 无毒菌株免疫保护力的测定
3.2.1 斜带石斑鱼的暂养
3.2.2 无毒哈维氏菌株菌液的制备
3.2.3 无毒株的接种
3.2.4 人工感染
4 结果
4.1 不同盐度浸泡感染
4.1.1 人工感染
4.1.2 水体中菌体含量的监测
4.2 无毒菌株免疫保护力的测定
5 讨论
结论
参考文献
作者在读期间发表论文情况
致谢
本文编号：3889657
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