马氏珠母贝热休克蛋白和Toll样受体基因的克隆与表达研究

发布时间：2024-02-14 21:15

　　本研究以马氏珠母贝（Pinctada martensii）为研究对象，利用本实验室构建的珍珠囊转录组和植核后6个时期珍珠囊的数字基因表达谱数据库。从中筛选出热休克蛋白基因和Toll样受体基因的Unigene片段。应用cDNA末端快速扩增（RACE）技术从马氏珠母贝外套膜中克隆了热休克蛋白60基因（PmHSP60）、热休克蛋白90基因（PmHSP90）、Toll样受体4基因（PmTLR4）、Toll-like protein基因（PmTLP）的cDNA序列全长，对其进行了生物信息学分析。并分析了四个基因的组织表达及在应激后不同时间点的表达。结果如下： 1.四个免疫基因cDNA全长的获取及其序列分析：PMHSP60基因cDNA全长为2495bp，开放阅读框为1734bp。PmHSP90基因cDNA全长为2584bp，开放阅读框为2160bp，编码719个氨基酸。PmTLR4基因cDNA全长3138bp，开放阅读框2697bp，编码899个氨基酸。PmTLP基因cDNA全长为2214bp，其中开放阅读框为2043bp，编码681个氨基酸。同源性比对分析发现，PmHSP60和PmHSP90与其...

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1TLR的两种结构

热休克蛋白60家族也是一个具有高度保守性的基因家族。在真核生物细胞中，主要存在线粒体，可以作为伴侣蛋白分子参与蛋白质的折叠以及亚细胞转运。近年来的研究表明，热休克蛋白60也可作为一个危险信号作用于天然免疫系统。通过激活单核白细胞、巨噬细胞等多种免疫细胞,并诱导产生一系列....

图1-2Toll样受体信号通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor

图1-2Toll样受体信号通路Fig.1-2Signalingpathwayoftoll-likereceptor在海洋动物在各个门中，很多TLRs已被确定（附录Ⅰ[97]）。在软体动物eguen等人在太平洋牡蛎的EST序列中发现三个与TLR通路信号分子（MyDAF....

图2-1pMD19-TVector克隆位点示意图

图2-1pMD19-TVector克隆位点示意图Fig.2-1SketchmapofpMD19-TVectorcloningsites)转化将将连接好的产物加入到已在冰上溶解的含100μLDH5α感受态细胞的管子轻吹打均匀；冰上放置30min（此时....

图2-23.RACE原理(引自Clontech技术手册)

143'RACE第一轮PCR以上述合成的cDNA第一链（for3’RACE）为模板，利用GSP-3’outer引物的通用引物（UniversalPrimerAMix，UPM)进行PCR反应。1)PCR反应体系：PremixTaq7.5μLcDNA第....

本文编号：3898628