长春地区鱼源嗜水气单胞菌分离株的毒力与耐药性研究

发布时间：2024-02-22 03:25

　　致病性嗜水气单胞菌是引起水生生物和兽畜败血症、人类腹泻和伤口感染的重要病原菌之一,不仅为水产养殖带来的巨大的经济损失,同时严重影响着人兽的公共健康。淡水鱼易受嗜水气单胞菌感染,该病通常以抗生素来控制,但抗生素的过度使用使该菌的耐药性不断上升并呈现多重耐药趋势。这不仅影响水产养殖业的发展,也为该病的防治工作带来较大困难,同时严重影响着水产品的质量和生态环境,给食品安全和社会公共卫生安全带来极大的挑战。掌握水产品中致病嗜水气单胞菌的分布及耐药情况,可为寻找安全、有效的防控方法奠定基础。本研究于2014-2015年采集多种鱼类(包括健康鱼和发病鱼)的鳃拭子、肠道内容物及淡水鱼养殖区水样369份,应用选择培养基对嗜水气单胞菌进行初步分离,并利用PCR方法检测毒力基因,同时采用普通PCR方法、16SrRNA测序、国标方法及生化鉴定对携带毒力基因的气单胞菌进行鉴定,鉴定后进行MLST分型;从样品中分离培养获得363株气单胞菌,筛选得到40株携带毒力基因的气单胞菌。其中发病鱼毒力基因阳性株分离率为32%(15/50),健康鱼毒力基因阳性株分离率为7.7%(24/313);种属鉴定中,经PCR方法鉴定...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3.1嗜水气单胞菌在RS上的生长形态

离培养培养基初步分离、RYAN培养基二次纯化后得到363株疑似嗜水气菌株均为革兰氏阴性、两端钝圆的短杆菌。嗜水气单胞菌在选择培N上形态见图3.1和图3.2。

图3.2嗜水气单胞菌在RYAN上的生长形态

图3.4嗜FigroL(782bpb表3Table3-4位基因gy15127172322嗜水气单胞菌g.3.4PCRpp)；3：gltA(6bp)；7：阴性-440株嗜水TheresultsyrBgroL5022429771617918831122....

图3.4嗜Fi嗜水气单胞菌g.3.4PCRp菌多位点序列

标准曲的荧光标准曲38.879和线的建立定量PCR方曲线(图3y=-3.19x方法10倍梯3.6)，16Sx+38.567，梯度稀释的rDNA基标准曲线的的标准质粒进基因及aer的相关系数进行检测，rA基因扩R2达到0.根据结扩增方.998和

图3.6荧荧光定量PCRR标准曲线

量PCRA基因水气单胞CR方法R方法扩增沙因及气溶素基胞菌ATCC法的特异性沙门氏菌、基因，检测C7966的模。肠球菌和大测结果为阴性模板呈现了大肠杆菌等性，与阴性良好的扩增等12种菌的性对照结果一增曲线，证明的嗜水气一致（图明了本双

本文编号：3906319