致病性海洋弧菌对氨基糖苷类药物的耐药传递机制初步研究

发布时间：2024-03-14 01:13

　　随着抗菌药物在水产养殖中用量的增加及混合使用现象的出现,水产病原菌表现出更强的耐药性甚至是多重耐药性,大大增加了水产养殖中细菌性病害防治的难度。细菌耐药性最常见的传递方式是耐药质粒的转移。本研究通过对多个水产致病弧菌质粒上新霉素及卡那霉素的耐药基因aph(3’)-IIa进行检测分析,并利用电穿孔法将筛选得到的3个受试菌株上的质粒分别转入大肠杆菌中,结果从3个转化子中检测到目的基因。进一步的药敏测试结果显示, 3个转化子的最小抑菌浓度(MIC值)以及最小杀菌浓度(MBC值)均明显上升。可见,在特定条件下,水生致病性弧菌对氨基糖苷类(新霉素和卡那霉素)的耐药质粒可转移至大肠杆菌并参与介导其耐药性,大大降低了受体菌对新霉素和卡那霉素的敏感性。本研究将为环境弧菌与临床细菌对氨基糖苷类药物的抗性传递研究提供数据基础和参考依据。

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【部分图文】：

图1水产致病菌药物耐药率分析

根据表2的药敏实验判定标准,对7株受试菌针对8类共14种抗菌药物的敏感性进行判断,7株受试菌均表现耐药(如图1),其中编号B2D的菌株对受试的14种药物均表现为耐药(即对受试药物耐药比例为100%),7株受试菌均对3类以上抗生素表现耐药,多重耐药率为100%;且7个菌株均对受试的....

图2耐药菌质粒电泳图

将药敏实验所筛选得到的耐药菌通过质粒提取试剂盒的处理,分析质粒携带情况(如图2)结果发现,7株受试菌均携带质粒,质粒携带率为100%,每株受试菌携带质粒大小约为1kb,均为小型质粒。用ddH2O代替质粒DNA作为阴性对照,以质粒DNA和基因组DNA作为模板,对氨基糖苷类耐药基....

图3质粒DNA耐药基因aph(3′)-ⅡaPCR产物电泳结果

用ddH2O代替质粒DNA作为阴性对照,以质粒DNA和基因组DNA作为模板,对氨基糖苷类耐药基因aph(3′)-Ⅱa进行PCR扩增。质粒DNA耐药基因扩增结果如图3所示,受试菌BBX1、BBXP1、NA0301、9H7均分别扩增出677bp的特异性片段且无其他杂带出现。以相应....

图4基因组DNA耐药基因aph(3′)-ⅡaPCR产物电泳结果

对在质粒DNA上检测出特异片段同时在相应基因组DNA上未检出特异片段的3株受试菌(BBX1、BBXP1和NA0301)进行耐药基因测序,用DNAstarMegAlign软件对耐药基因测序结果进行分析,结果表明BBX1、BBXP1、NA0301中的aph(3′)-Ⅱa耐药基因与....

本文编号：3927840