钾离子通道在星斑川鲽（Platichthys stellatus)先天性免疫防御中旳作用研究

发布时间：2024-05-28 19:47

　　钾离子通道是细胞膜上仅允许钾离子通过的一类重要离子通道,参与机体多种生理功能的调节,在鱼类先天性免疫防御中起着十分重要的作用。KCNN2属于小电导钙激活型钾离子通道家族,具有Ca2+高敏感性和K+选择性等特点,是淋巴细胞和中性粒细胞上的钾离子通道之一。淋巴细胞和中性粒细胞是生物体重要的免疫细胞,当细胞受刺激被激活时,钾离子通道通过调节胞内离子浓度和膜电位水平,参与淋巴细胞和中性粒细胞的激活、呼吸爆发、细胞因子分泌和整个机体的免疫应答。星斑川鲽(Platichthys stellatus)是一种极具商业开发价值的比目鱼,目前被认为是继大菱鲆(Psetta maxima)、牙鲆(Paralichthys olivaceus)之后潜力巨大的养殖鱼类之一。水产养殖病害的频繁爆发,严重限制了养殖业在我国的健康可持续发展。研究发现钾离子通道与机体的多种免疫功能发挥作用都有着密不可分的关系。因此,深入了解钾离子通道在星斑川鲽先天性免疫防御机制和调控机制中的作用,对于揭示鱼类免疫应答机制、控制鱼类病害的发生、推动星斑川鲽养殖产业的发展等都有着重要的理论和现实意义。本文以星斑川鲽外周血中淋巴细胞的cDN...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２钟离子通道分类［９３Ｊ??

＝个亚类［８１赵］。??１．３．２．３电压口控型钟离子通道（Ｋｖ）??电压口控型卿离子通道有１个Ｐ区和６个跨膜区，如图１．２Ａ所示。该通道的开??放与关闭是由膜内外电位的变化来调控的，因化该通道又被成为电压依赖型巧??离子通道。Ｋｖ通道是钟离子通道家族中成员最多，研巧最深入的一类....

图１．３星斑川蝶（正面观）??巧餐．１．３?Ｓｔａｒｒｙ?ｆｌｏｕｎｄｅｒ?（尸ｔｏ／ｃ■知片５化／／幻ｔｏ）??

海水养殖业的病害问题。??１．４本研究的主要内容及意义??本研究的实验材料为星斑川鱗（如图１．３所示）。星斑川蝶（巧咕Ｓ??？Ｓ化化前＜５?）隶属媒形目（Ｐｌｅｕｒｏｎｅｃｔｉｆｏｒｍｅｓ）媒科（Ｐｌｅｕｒｏｎｅｃｔｉｄａｅ?），星媒属??（巧如Ｗｉ／皆＊），又名星鱗、星突江饌、....

图２．１星斑川蝶外周血淋己细胞计数??Ｆｉｇ．?２．１?Ｔｈｅ?ｃｏｕｎｔ?ｏｆｌｙｍｐｈｏｃｙ?化?Ｓ?ｓｅｐａｒａｔｅｄ?ｆｒｏｍ?Ｓ?化?ｎｙ?ｆｌｏｕｎｄｅｒ?ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ?ｂｌｏｏｄ??

２．２．１淋田细跑的计数??将过夜培养的淋己细胞在倒置显微镜下观察，发现淋己细胞悬浮生长，呈圆??形和欄圆形，用台盼盛染色，进行淋己细胞活细胞计数（图２．１），经计算分离到??的淋己细胞达到１０６个／ｍＬ，存活率在９９％Ｌ：Ｊ？上，按照这种条件培养的淋臣细胞??可稳定存活４－５天....

图２．２星斑川魏ｃＤＮＡＰＣＲ结果??．．

?１．９６１??２．２．３?ｃＤＮＡ?质童??Ｗ?ｐ－ａｃｔｉｎ?Ｆ和ｐ－ａｃｔｉｎ民为引物对淋己细胞ｃＤＮＡ进行ＰＣＲ，结果如图２．２??所示。Ｐ－ａｃｔｉｎＰＣ民产物大小约在１８０ｂｐ，与预期片段大小一致，说明逆转录合成??的ｃＤＮＡ质量较好ＵＷ，可１＾作为钟离子通道基因克隆....

本文编号：3983640