‘霞多丽’葡萄体细胞胚再生体系建立及畸形胚发生机理解析

发布时间：2024-04-25 05:48

　　体细胞胚发生途径是实现葡萄遗传转化进行性状改良的基础。然而,胚性细胞诱导效率低、保持与扩繁能力差、畸形胚发生频率高等问题严重影响体细胞胚发生技术的应用与发展。特别是,大量畸形胚的发生严重制约体细胞胚的正常成苗。因此,解析畸形胚的发生机理或对畸形胚循环利用是葡萄体细胞胚再生体系中的核心问题之一。本研究以白色酿酒葡萄品种‘霞多丽’葡萄为试材,通过调节植物激素浓度与配比优化,建立高效稳定的酿酒葡萄‘霞多丽’体胚再生体系,以再生途径中产生的四种不同形态胚(正常胚、胚轴伸长胚、玻璃化胚、子叶融合胚)为材料进行畸形胚的循环利用研究,并从组织学鉴定、内源激素水平以及miRNAs调控层面解析了畸形胚发生的内在机理。主要结果如下:1.建立了‘霞多丽’体细胞胚再生体系。以未开放的小花蕾为试材,采用NaClO二次消毒进行花蕾接种时污染率与采样保存时间呈明显的正相关。在六种不同的胚性愈伤组织诱导培养基中,MC(NN69+0.55 mg·L-1 2,4-D+0.5 mg·L-1 NOA+1.24 mg·L-1 4-CPPU+30 g·L-1 Sucrose+3 g·L-1 Phytagel)、PIV(NN69+...

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１本研究的技术路线??Ｆｉｇｕｒｅ?１－１?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏｕｔｅ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｒｅｓｅａｒｃｈ??

宁夏大学硕士学位论文?第一章引言??１．５．３研究技术路线??以欧洲葡萄‘霞多丽，（ＫｙｉＨｔｙｅｒａｃｖ．Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ）为试材???±???ｉ???ｉ???花序采集、消毒、接种?｜体胚循环诱导愈伤组织?｜畸形胚形态学、解剖学观察??Ｉ?Ｖ?＋??胚性愈伤＞织诱｜不同种‘....

图２－５?４?ｐＭ?ＡＢＡ对原胚团诱导的影响（标尺＝０．５?ｃｍ）??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?４?（ｉＭ?ＡＢＡ?ｏｎ?ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｒｏｅｍｂｒｙｏｇｅｎｉｃ?ｍａｓｓｅｓ?（ＰＥＭ）?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?０．５?ｃｍ）??

宁夏大学硕士学位论文?第二章欧洲葡萄‘霞多丽’体细胞胚再生体系的建立??中胚性材料的高效诱导、保持与扩繁进而为遗传转化及体胚萌发再生提供大量的材料，以葡萄花??蕾诱导形成的胚性愈伤组织为材料，将其置于ＭＰＭ培养基进行原胚团的诱导与保持，分别于３０??ｄ、６０?ｄ、９０?ｄ、１２０....

图３－４玻璃化胚的体胚再生??Ｆｉｇｕｒｅ?３－４?Ｓｏｍａｔｉｃ?ｅｍｂｒｙｏｓ?ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｖｉｔｒｉｆｉｅｄ?ｅｍｂｒｙｏｉｄｓ??

宁夏大学硕士学位论文?第三章‘霞多丽’体细胞胚的循环诱导体系的建立??３４，?Ａ－Ｂ），不利于体胚再诱导，将其置于Ｘ６培养基继续观察其形态，结果发现干枯褐化的组??织上直接形成原胚团或二次体胚，形态结构正常，呈白色（图３４，?Ｃ－Ｄ）。??接种??诱导（５?ｍｏｎｔｈｓ）???５....

图３－３?‘霞多丽’葡萄子叶胚诱导愈伤组织??Ｆｉｇｕｒｅ?３－３?Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ?ｅｍｂｒｙｏ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ｃａｌｌｕｓ?ｏｆ?Ｖｉｔｉｓ?ｖｉｎｉｆｅｒａ?ｃｖ．?＇Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ＇??

宁夏大学硕士学位论文?第三章‘霞多丽’体细胞胚的循环诱导体系的建立??３４，?Ａ－Ｂ），不利于体胚再诱导，将其置于Ｘ６培养基继续观察其形态，结果发现干枯褐化的组??织上直接形成原胚团或二次体胚，形态结构正常，呈白色（图３４，?Ｃ－Ｄ）。??接种??诱导（５?ｍｏｎｔｈｓ）???５....

本文编号：3964100