重组家蚕素Ⅱ促进HepG2细胞的增殖作用

发布时间：2022-01-01 02:17

　　目的探讨重组家蚕素基因（MBbxⅡ）稳定转染HepG2细胞后对细胞的生物学作用.方法将MBbxⅡ基因稳定转染于HepG2细胞中,以转染空质粒及未进行转染的HepG2细胞作为空白对照组,分别应用MTT方法检测细胞生长率,流式细胞术检测细胞周期.结果稳定转染MBbxⅡ基因的HepG2细胞增殖能力增强,且细胞多处于G2和S期.结论 MBbxⅡ促进了HepG2细胞增殖,可为研究MBbxⅡ在哺乳动物细胞中的胰岛素样作用奠定基础. 

【文章来源】：北华大学学报(自然科学版). 2020,21(01)

【文章页数】：3 页

【部分图文】：

细胞周期

1)细胞样品的准备:应用0.25%胰酶消化终止原细胞培养液;离心保留细胞沉淀;应用预冷的0.1 mol PBS进行冲洗;离心保留细胞沉淀;重悬细胞．2)细胞固定:应用预冷的70%乙醇1 m L与重悬细胞混匀;离心保留细胞沉淀;预冷0.1 mol PBS重悬细胞;离心保留细胞沉淀．3)染色:每个样品加0.5 m L碘化丙啶染色液，缓慢重悬细胞沉淀;37℃避光温浴30 min.4)流式检测和分析:应用流式细胞仪激发红色荧光及光散射情况，在波长488 n m处测定吸光度值，并行细胞DNA含量分析和光散射分析．2 结果

3组细胞各取3个样，并计算平均值，流式细胞术检测结果显示:pcDNA3.1-MBbxⅡ-HepG2组G2+S期细胞为52.17%，较pcDNA3.1-HepG2组(42.99%)及未转染组(34.221%)HepG2细胞G2+S期比例增高，进一步证实MBbxⅡ基因对Hep G2细胞具有促进增殖作用．见表1，图3.图3 细胞周期

【参考文献】：
期刊论文
[1]饥饿胁迫对家蚕糖脂代谢的影响及BmFoxO的作用[J]. 孟竹,文茂羽,康晓丽,卢忠燕,赵萍,夏庆友.  昆虫学报. 2018(08)
[2]昆虫胰岛素生理功能的研究进展[J]. 谢鹏飞,李正辉,黄茜,吴进才,刘井兰.  环境昆虫学报. 2018(04)
[3]糖尿病诱导剂链脲佐菌素与原核表达的家蚕素Ⅱ对家蚕血糖含量的影响[J]. 孙凌云,徐欣,杨洋,吴亚群,刘庆信,崔为正.  蚕业科学. 2015(03)
[4]重组家蚕素Ⅱ基因稳定转染HepG2细胞及鉴定[J]. 王玲玲,吴雷,杜珍武,张玉成,张桂珍.  中国老年学杂志. 2012(04)
[5]家蚕素Ⅱ基因真核表达载体的构建[J]. 李洪霞,杜珍武,张玉成,郑锦花,吕俊峰,张桂珍.  中国实验诊断学. 2011(01)
[6]家蚕类胰岛素肽的结构及信号传导与作用[J]. 孔祥宾,徐世清.  蚕业科学. 2010(03)

博士论文
[1]重组家蚕素Ⅱ对哺乳细胞胰岛素样作用及其机制的体外研究[D]. 王玲玲.吉林大学 2012



本文编号：3561456