穗醋栗MYB1和MYB10转录因子的克隆及功能解析
发布时间：2022-01-17 13:48
穗醋栗是茶藨子科（Saxifrgaceae）茶藨子属（Ribes L.）小浆果类植物,按照农艺性状分为黑穗醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗,果实颜色分别为紫黑色、红色和白色,营养成份丰富,而且黑穗醋栗和红穗醋栗果实中富含花色苷。花色苷是一种天然水溶性类黄酮物质,这种物质对人身体机能的调节以及营养物质的吸收有一定的作用,特别在预防一些神经疾病和心脑血管疾病方面有突出功效。结构基因和调控基因是影响花青素生物合成的两个主要类别。迄今为止,激活花青素途径中结构基因转录的由R2R3-MYB转录因子、bHLH类转录因子和WD40蛋白组成的MYB-bHLH-WD40（MBW）转录复合体被广泛研究。最近的许多研究表明花青素生物合成受到转录,转录后和翻译后机制的控制,MBW复合物中的R2R3-MYB蛋白通常在花青素生物合成和积累中起关键作用。为探究不同穗醋栗品种花色苷生物合成的分子机理,本研究以黑穗醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗的栽培种为试验材料,应用RACE方法克隆了与穗醋栗花色苷合成相关的MYB1基因全长序列,并对穗醋栗MYB1基因进行基因特征及系统进化分析。利用实时定量PCR分析穗醋栗果实5个不同生长发育时期M...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２花色苷的生物合成途径［Ｉ４］??１．３花色苷合成途径中关键结构基因??
?２穗醋栗ＭＹＢ１转录因子的克隆???２穗醋栗ＭＹＢ１转录因子的克隆??２．１试验材料??以采摘自东北农业大学的５个生长发育时期的黑穗醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗果实??为试验材料，分别采摘于２０１７年５月上旬至７月末，液氮速冻，置于－８０?°Ｃ保存使用。??Ｋ鐵＾：奪??動＾爾’?’?：趙—??＜５．０?＇０％；?５．卜７．０?１．２５％）?７．卜．９．０?１．５０％；?９．１－１１．０?（?７５％；?＞１１．１?？?１００°〇）??图２－１不同生长发育阶段的穗醋栗果实（果径／ｍｍ），Ｂａｒ＝５ｍｍ。??注：从上至下为黑素醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗，穗醋栗果实转色程度括号中的数字己标出??２．２试验试剂??２．２．１?ＲＮＡ提取试剂??植物通用总ＲＮＡ提取试剂盒购自于北京Ｂｉｏｔｅｋｅ生物技术有限公司；７５％乙醇购??自于哈尔滨赛拓生物技术有限公司；ＲＮａｓｅ－ｆｒｅｅｄｄＨ：０；?ｌＯｘＭＯＰＳ缓冲液；ＲＮＡ上样??缓冲液。??２．２．２?ＲＡＣＥ法克隆所用试剂??反转录试剂盒?Ｆｉｒｓｔ?Ｓｔｒａｎｄ?ｃＤＮＡ?Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｋｉｔ、；？￡＞ｉ５Ｔ－Ｔ５?Ｃｌｏｎｉｎｇ?Ｋｉｔ??载体试剂盒、Ｔｒａｎｓ７ｉ／（７１Ｍ?ＨｉＦｉ?ＤＮＡ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ、卡纳霉素（Ｋａｎａ?）、Ｍａｒｋｅｒ??（ＤＬ２０００?）均购自北京全式金（ＴｒａｎｓＧｅｎ?）；?Ｈｉｇｈ?Ｐｕｒｅ?ＰＣＲ?Ｐｒｏｄｕｃｔ?Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?Ｋｉｔ??（ｃＤＮＡ?产物纯化试剂盒）购自?Ｒｏｃｈｅ?公司；Ｔｅｒｍｉｎａｌ?Ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｔｉｄｙｌ?Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ??（ＴｄＴ）?５＇末端加尾反
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【参考文献】：
期刊论文
[1]百合花青素合成调控的研究进展[J]. 肖伟,张铭芳,张秀海,王倩,董然. 北方园艺. 2018(20)
[2]植物花青素合成途径中的调控基因研究进展[J]. 宫硖,薛静,张晓东. 生物技术进展. 2011(06)
硕士论文
[1]汉源黑樱桃MYB10基因的克隆、表达及功能验证[D]. 关雎.四川农业大学 2018
[2]茄子花青素生物合成关键MYB转录因子的筛选及克隆[D]. 王世界.山东农业大学 2016
[3]红穗醋栗种植资源研究与评价[D]. 乔晓颖.吉林农业大学 2011
本文编号：3594836
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２花色苷的生物合成途径［Ｉ４］??１．３花色苷合成途径中关键结构基因??
?２穗醋栗ＭＹＢ１转录因子的克隆???２穗醋栗ＭＹＢ１转录因子的克隆??２．１试验材料??以采摘自东北农业大学的５个生长发育时期的黑穗醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗果实??为试验材料，分别采摘于２０１７年５月上旬至７月末，液氮速冻，置于－８０?°Ｃ保存使用。??Ｋ鐵＾：奪??動＾爾’?’?：趙—??＜５．０?＇０％；?５．卜７．０?１．２５％）?７．卜．９．０?１．５０％；?９．１－１１．０?（?７５％；?＞１１．１?？?１００°〇）??图２－１不同生长发育阶段的穗醋栗果实（果径／ｍｍ），Ｂａｒ＝５ｍｍ。??注：从上至下为黑素醋栗、红穗醋栗和白穗醋栗，穗醋栗果实转色程度括号中的数字己标出??２．２试验试剂??２．２．１?ＲＮＡ提取试剂??植物通用总ＲＮＡ提取试剂盒购自于北京Ｂｉｏｔｅｋｅ生物技术有限公司；７５％乙醇购??自于哈尔滨赛拓生物技术有限公司；ＲＮａｓｅ－ｆｒｅｅｄｄＨ：０；?ｌＯｘＭＯＰＳ缓冲液；ＲＮＡ上样??缓冲液。??２．２．２?ＲＡＣＥ法克隆所用试剂??反转录试剂盒?Ｆｉｒｓｔ?Ｓｔｒａｎｄ?ｃＤＮＡ?Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｋｉｔ、；？￡＞ｉ５Ｔ－Ｔ５?Ｃｌｏｎｉｎｇ?Ｋｉｔ??载体试剂盒、Ｔｒａｎｓ７ｉ／（７１Ｍ?ＨｉＦｉ?ＤＮＡ?Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ、卡纳霉素（Ｋａｎａ?）、Ｍａｒｋｅｒ??（ＤＬ２０００?）均购自北京全式金（ＴｒａｎｓＧｅｎ?）；?Ｈｉｇｈ?Ｐｕｒｅ?ＰＣＲ?Ｐｒｏｄｕｃｔ?Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ?Ｋｉｔ??（ｃＤＮＡ?产物纯化试剂盒）购自?Ｒｏｃｈｅ?公司；Ｔｅｒｍｉｎａｌ?Ｄｅｏｘｙｎｕｃｌｅｔｉｄｙｌ?Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ??（ＴｄＴ）?５＇末端加尾反
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【参考文献】：
期刊论文
[1]百合花青素合成调控的研究进展[J]. 肖伟,张铭芳,张秀海,王倩,董然. 北方园艺. 2018(20)
[2]植物花青素合成途径中的调控基因研究进展[J]. 宫硖,薛静,张晓东. 生物技术进展. 2011(06)
硕士论文
[1]汉源黑樱桃MYB10基因的克隆、表达及功能验证[D]. 关雎.四川农业大学 2018
[2]茄子花青素生物合成关键MYB转录因子的筛选及克隆[D]. 王世界.山东农业大学 2016
[3]红穗醋栗种植资源研究与评价[D]. 乔晓颖.吉林农业大学 2011
本文编号：3594836
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