小鼠脑微血管内皮细胞的原代培养与鉴定

发布时间：2022-02-23 23:54

　　目的探索和建立一种纯度高、操作简单且重复性强的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法。方法通过剪碎、过细胞筛网等物理方法,结合白蛋白密度梯度离心及化学酶消化法,并以严格控制1 g/LⅡ型胶原蛋白酶消化作用时间15～20 min为首要,从2～3周龄ICR小鼠脑组织中分离培养出小鼠脑微血管内皮细胞。通过细胞形态学观察和免疫细胞化学染色检测Ⅷ因子相关抗原鉴定所培养的细胞。结果接种24 h,贴壁的血管段周围爬出多角形或短梭状细胞,并逐渐扩散成团簇状; 7 d后细胞融合,呈典型的单层、"铺路石样"镶嵌式排列。Ⅷ因子相关抗原细胞免疫化学染色鉴定为阳性,胞质呈棕红色,内皮细胞纯度达95%以上。结论成功建立了一种操作简单、重复性强、目的细胞纯度高的小鼠脑微血管内皮细胞原代培养方法。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2020,36(04)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 BMEC的原代培养
        1.2.2 BMEC的传代培养
        1.2.3 免疫细胞化学染色检测BMEC的Ⅷ因子相关抗原表达
2 结果
    2.1 形态学观察
    2.2 分离培养的细胞表达Ⅷ因子相关抗原
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]原代大鼠脑微血管内皮细胞的培养及鉴定[J]. 马华根,唐元瑜,纪立金.  解剖学杂志. 2018(03)
[2]小鼠脑微血管内皮细胞的分离培养与鉴定[J]. 宋晓彬,范春娥,王烨,张艺腾,崔丛丛,曾卫卫,郑丽蓉,蔡晓洁,陈华群.  南京师大学报(自然科学版). 2017(03)
[3]一种高纯度小鼠原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法[J]. 张作慧,陈晨,陈浩,崔桂云,花放.  中国组织工程研究. 2016(51)
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本文编号：3641550