海马外泌体中miR-219a-1-3p对神经干细胞向神经元分化的影响

发布时间：2022-10-30 20:02

　　目的:探讨海马外泌体中miR-219a-1-3p对神经干细胞（neural stem cells, NSCs）向神经元分化的影响。方法:切割穹窿海马伞,构建去神经支配海马大鼠模型,分离提取切割组和正常组海马外泌体,与SD大鼠海马NSCs共培养,利用实时定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction, Real-time PCR）、Western Blot和免疫荧光技术检测外泌体在NSCs向神经元分化中的作用;通过RNA-seq方法检测外泌体中表达变化的miRNA,利用Real-time PCR对差异表达的miR-219a-1-3p进行验证,并检测其在成年SD大鼠各组织以及NSCs、星形胶质细胞和神经元中的表达水平。利用miR-219a-1-3p mimic转染NSCs,Real-time PCR、Western Blot和细胞免疫荧光检测miR-219a-1-3p对NSCs向神经元分化的影响。结果:切割组海马组织外泌体可促进NSCs向神经元分化;海马组织外泌体中差异表达的miR-219a-1-3p与RNA-seq结果一致;miR-219a-1... 

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 海马微环境总外泌体提取
    1.3 胚胎海马NSCs分离培养及体外诱导分化
    1.4神经元和星形胶质细胞的分离培养
    1.5 Real-time PCR
    1.6 Western Blot
    1.7 细胞免疫荧光
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 大鼠海马外泌体促进NSCs向神经元分化
    2.2 大鼠海马外泌体RNA-seq及验证
    2.3 miR-219a-1-3p在大鼠多组织细胞中的表达
    2.4 miR-219a-1-3p对NSCs向神经元分化的影响
3 讨论
李雯，等.海马外泌体中miR-219a-1-3p对神经干细胞向神经元分化的影响



本文编号：3699394