人工抗氧化肽的设计、表达纯化及功能表征

发布时间：2023-01-12 18:46

　　为获得具有抗氧化功能的寡肽,人工设计了3条由不同寡肽串联组成的含胰蛋白酶切割位点的多肽序列,分别命名为ATO、ATW和WIT,并在E. coli BL21（DE3）宿主中实现可溶性表达。纯化的多肽经过胰蛋白酶处理得到3种多肽水解物,体外抗氧化性功能评价实验表明,3种多肽水解物均对不同自由基具有清除作用,其中ATW多肽水解物抗氧化性最强,对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的IC₅₀值分别为0.53、0.45、0.34 mg/mL。本研究为制备抗氧化肽提供一种新思路。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 菌株和质粒
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 培养基
    1.2 菌株构建
    1.3 重组大肠杆菌的发酵
    1.4 多肽的纯化
    1.5 寡肽的水解制备
    1.6 抗氧化性测定
        1.6.1 对DPPH自由基的清除能力测定
        1.6.2 对超氧阴离子自由基的清除能力测定
        1.6.3 对羟基自由基的清除能力测定
        1.6.4 半抑制浓度IC50的测定
2 结果与分析
    2.1 重组抗氧化肽的构建
    2.2 重组肽的表达分析
    2.3 重组肽的纯化与酶解
    2.4 多肽水解物的抗氧化性评价
        2.4.1 对DPPH自由基的清除能力
        2.4.2 对超氧阴离子自由基的清除能力
        2.4.3 对羟基自由基的清除能力
        2.4.4 多肽水解前后抗氧化活性比较
3 结语


【参考文献】：
期刊论文
[1]酶解制备羊胎盘抗氧化肽工艺条件的优化[J]. 姜惠敏,李明,曹光群,杨成.  食品与生物技术学报. 2017(01)
[2]新疆阿魏菇抗氧化肽分离纯化及抗氧化性质[J]. 郑晓吉,许程剑,牛博楠,陈帅,王雪铭,朱丽莉.  食品与生物技术学报. 2015(05)
[3]螺旋藻抗氧化肽的制备及其体外活性研究[J]. 欧贇,乔燕燕,王维有,候凡,王宇,任迪峰,鲁军.  食品与生物技术学报. 2014(01)
[4]抗氧化肽的构效关系研究进展[J]. 张晖,唐文婷,王立,钱海峰,齐希光.  食品与生物技术学报. 2013(07)
[5]氧化应激状态的评价[J]. 王秋林,王浩毅,王树人.  中国病理生理杂志. 2005(10)



本文编号：3730295