高寒草地土壤产漆酶真菌筛选及其生物功能的研究

发布时间：2020-07-25 15:02

【摘要】：漆酶与木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶共同构成木质素降解酶系,在土壤腐殖质和有机质的形成过程中具有重要作用。为了探索和发现高寒草地土壤耐低温产漆酶真菌资源,进一步认识漆酶对高寒草地土壤有机质转化的作用,本论文主要开展了高寒草地土壤产漆酶真菌筛选、优良菌株生物学特性、漆酶的酶学性质以及对土壤有机质的矿化作用等4个方面的研究。研究结果如下:1、采用底物显色法从高寒草地土壤中筛选了9株产漆酶真菌,采用ITS-rDNA方法进行分子鉴定,鉴定结果为菌株1.9为Uncultured fungus clone.、2.1a为Scytalidium、310b为Marasmius tricolor、2.1c为Saccharicola、2.3a为fungal sp、2.4d为Saccharicola、10a为Marasmiusrotalis、3.7c为Alternaria.、WB为Verticillium longisporum。除菌株3.7c以外,其余8株菌株在以愈创木酚、蒽酮、邻联甲苯胺、联苯胺为底物的选择性培养基上都能产生氧化带;漆酶酶活力测定结果表明,菌株310b产漆酶的酶活力为1.62IU,与其余8个菌株相比酶活力最高,且差异显著(P0.05)。2、以产漆酶活力最高的菌株Marasmius tricolor310b为研究对象,在不同条件下(温度、碳源、氮源、pH以及盐浓度)测定了菌落生长直径,结果表明,供试菌株310b在30℃,pH值为4.8,不添加NaCl的条件下生长最快,且差异显著(P0.05);以不加碳源为对照,添加蔗糖和糊精2种碳源后,菌落生长最快(P0.05);赖氨酸和尿素两种氮源对菌株的生长具有明显的抑制作用(P0.05)。3、在不同温度、初始pH、金属离子和非营养有机物条件下,测定了菌株Marasmius tricolor310b产漆酶的酶活力。结果表明:菌株310b产酶最适反应温度为35℃,在0-45℃可保持较高酶活力;最适反应pH为4.5,在4.0-7.0范围内保持较高酶活;与对照相比Fe~(2+)、Fe~(3+)对酶活力有抑制作用(P0.05);乙醇可以增加酶活力(P0.05),而已腈、H_2O_2、SDA、EDTA对酶活力有抑制作用(P0.05),其中H_2O_2的抑制作用最强,添加丙酮对酶活力没有影响。4、通过测定土壤CO_2释放量、土壤有机碳矿化速率、土壤有机碳含量、土壤微生物生物量碳含量以及土壤微生物呼吸熵。结果表明:添加产漆酶真菌菌株310b菌悬液后,上述各指标值均高于对照组,且都呈现规律性变化,说明产漆酶真菌菌株310b产生的漆酶对土壤有机质的形成转化过程具有促进作用。
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S812.2
【图文】：

青海大学硕士论文 第 1 章 前言过程和机制的认识。同时，也为漆酶资源的发掘和工业化利用提供理论依据。1.6.2 研究内容1、高寒草地产漆酶真菌的筛选及分子鉴定；2、产漆酶菌株 Marasmius tricolor 310b 的生物学特性的研究；3、产漆酶菌株 Marasmius tricolor 310b 的产酶特性的研究；4、产漆酶菌株 Marasmius tricolor 310b 对土壤有机质的矿化作用的研究；1.6.3 研究路线本论文的研究内容按以下技术路线图

图 2.2 愈创木酚 图 2.3 联苯胺ure 2.2 wood-induced phenoli Figure 2.3 bibenzidine图 2.4 蒽酮 图 2.5 邻甲苯胺Figure 2.4Anthrone Figure 2.5 o-toluidine

图 2.2 愈创木酚 图 2.3 联苯胺ure 2.2 wood-induced phenoli Figure 2.3 bibenzidine图 2.4 蒽酮 图 2.5 邻甲苯胺Figure 2.4Anthrone Figure 2.5 o-toluidine

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本文编号：2769982