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精氨酸基于NO途径参与调控限饲母羊卵泡发育机制的研究

发布时间:2022-04-26 19:00
  湖羊因其性成熟早、四季发情等优点越来越受到市场青睐,随着湖羊饲养规模的扩大和饲养方式的不断转变,多种饲养管理问题日益突出。营养不良会抑制卵泡发育、改变卵泡内微环境稳态、增加闭锁卵泡率,导致母畜出现延迟发情征兆、进而影响其繁殖力。研究已证实,黄体期短期补饲(如提高营养水平、补饲羽扇豆,注射葡萄糖或混合支链氨基酸等)均能够促进卵泡发育,提高排卵率。精氨酸(Arginine,Arg)作为条件性必需氨基酸,除参与机体蛋白合成外还可通过多种代谢途径调节机体的生殖生理功能。此外,Arg作为NO合成的重要前体物质,可通过Arg-NO途径参与多种生理活动,如调节卵泡发育、类固醇激素合成和排卵等过程。同时,NO还可参与线粒体生物合成的调节。但在营养匮乏情况下,注射Arg能否缓解能量不足引起卵泡发育异常,及其参与卵泡发育的作用机制还有待进一步研究。基于此,本研究以限饲处理湖羊为研究对象,通过Arg注射处理,观察其对湖羊发情的影响,探究Arg-NO信号通路参与调控湖羊卵泡发育的潜在机制。试验分为如下四部分:试验一、Arg对黄体期限饲湖羊NO-cGMP通路核心因子表达及卵泡发育的影响本试验旨在探究注射Arg对... 

【文章页数】:140 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
缩略词(Abbreviation)
引言
    参考文献
第一篇 文献综述
    第一章 营养水平影响哺乳动物卵泡发育的研究进展
        1 卵泡发育与闭锁概述
            1.1 卵泡的概念与分类
            1.2 卵泡的形成与发育过程
            1.3 卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡
            1.4 影响卵泡发育和闭锁的因素
        2 营养水平对卵泡发育的影响
            2.1 营养水平对生殖激素的影响
            2.2 营养水平对卵泡波及排卵的影响
            2.3 营养水平影响卵泡发育的机制
        3 黄体期短期饲喂对卵泡发育的影响
        4 展望
        参考文献
    第二章 精氨酸与雌性动物生殖调控
        1 Arg的化学结构和理化性质
        2 Arg的合成途径
        3 Arg的代谢途径
        4 Arg-NO对下丘脑-垂体轴的影响
        5 Arg-NO对卵巢卵泡发育与闭锁的影响
            5.1 Arg-NO调控卵泡类固醇激素的生成
            5.2 Arg-NO调控雌性动物卵泡发育
            5.3 Arg-NO在卵泡闭锁中的作用
            5.4 Arg-NO调控卵泡发育的可能机制
        6 展望
        参考文献
第二篇 试验研究
    第三章 Arg对黄体期限饲湖羊NO-cGMP通路核心因子表达及卵泡发育的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验动物
            1.2 试验设计
            1.3 主要仪器与试剂
            1.4 试验方法
            1.5 统计分析
        2 结果
            2.1 对限饲湖羊体重和发情时间的影响
            2.2 对血液Arg代谢产物及NOS活性的影响
            2.3 对卵巢重及卵泡发育的影响
            2.4 对卵巢组织中NO-cGMP通路相关基因表达的影响
            2.5 对卵巢组织中cGMP浓度的影响
        3 讨论
        4 本章小结
        参考文献
    第四章 Arg对黄体期限饲湖羊主要生殖激素相关基因表达的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验动物
            1.2 试验设计
            1.3 主要仪器与试剂
            1.4 试验方法
            1.5 统计分析
        2 结果
            2.1 对湖羊下丘脑GnIH和GnRH浓度的影响
            2.2 对GnIH和GnRH基因及其受体的影响
            2.3 对FSH和LH基因及其受体表达的影响
            2.4 对卵巢组织类固醇激素合成酶基因和蛋白表达的影响
            2.5 对不同直径卵泡液中E_2、P_4浓度的影响
            2.6 对不同直径卵泡类固醇激素合成酶基因和蛋白表达的影响
        3 讨论
        4 本章小结
        参考文献
    第五章 Arg对黄体期限饲湖羊卵巢组织氧化应激的影响
        1 材料与方法
            1.1 试验动物
            1.2 试验设计
            1.3 主要仪器与试剂
            1.4 试验方法
            1.5 统计分析
        2 结果
            2.1 对血清及卵巢组织中抗氧化能力的影响
            2.2 对卵巢组织中抗氧化基因和蛋白表达的影响
            2.3 PPARGC1A在绵羊卵巢组织的定位
            2.4 对线粒体发生相关基因和蛋白表达的影响
            2.5 对卵巢组织中能量代谢关键因子表达的影响
        3 讨论
        4 本章小结
        参考文献
    第六章 NO参与调控体外培养山羊颗粒细胞类固醇激素合成和凋亡的研究
        1 材料与方法
            1.1 样品采集
            1.2 主要仪器与试剂
            1.3 试验方法
            1.4 统计分析
        2 结果
            2.1 eNOS在体外培养颗粒细胞中的表达
            2.2 NO对颗粒细胞培养液中NO_3~-/NO_2~-含量的影响
            2.3 NO对颗粒细胞中cGMP浓度的影响
            2.4 NO对颗粒细胞P_4和E_2合成及关键基因表达的影响
            2.5 NO对颗粒细胞凋亡的影响
            2.6 NO对颗粒细胞线粒体膜电位和mtDNA含量的影响
            2.7 NO对颗粒细胞线粒体相关基因及蛋白表达的影响
            2.8 NO对颗粒细胞氧化应激的影响
        3 讨论
        4 本章小结
        参考文献
全文结论
创新点
进一步研究的内容
攻读博士学位期间论文发表
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]Arginine, N-carbamylglutamate,and glutamine exert protective effects against oxidative stress in rat intestine[J]. Liang Xiao,Wei Cao,Guangmang Liu,Tingting Fang,Xianjian Wu,Gang Jia,Xiaoling Chen,Hua Zhao,Jing Wang,Caimei Wu,Jingyi Cai.  Animal Nutrition. 2016(03)
[2]Cell-specific expression and immunolocalization of nitric oxide synthase isoforms and the related nitric oxide/cyclic GMP signaling pathway in the ovaries of neonatal and immature rats[J]. Wei ZHANG,Quan-wei WEI,Zheng-chao WANG,Wei DING,Wei WANG,Fang-xiong SHI (Laboratory of Animal Reproduction,College of Animal Science and Technology,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China).  Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2011(01)
[3]内皮型一氧化氮合酶脱偶联与氧化应激[J]. 张洪平,唐宁,卞卡.  辽宁中医药大学学报. 2009(12)
[4]精氨酸营养(一):精氨酸族氨基酸在猪营养与生产中的重要作用<上篇>[J]. 冯占雨,Fuller W.Bazer,Teresa A.Davisa.  国外畜牧学(猪与禽). 2008(06)
[5]Icariin promotes expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 during cardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem cells in vitro[J]. Ling DING,Xing-guang LIANG,Dan-yan ZHU,Yi-jia LOU~2Institute of Pharmacology and Toxicology and Biochemical Pharmaceutics,College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China.  Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[6]Apoptosis in Granulosa cells during follicular atresia: relationship with steroids and insulin-like growth factors[J]. Yuan Song YU, Hong Shu SUI, Zheng Bin HAN, Wei LI, Ming Jiu LUO, Jing He TAN Laboratory of Animal Reproduction and Embryology College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China Present address: College of life science. University of Beijing, Beijing, China..  Cell Research. 2004(04)

博士论文
[1]PGC-1α和NRF-1在山羊卵泡闭锁、卵母细胞老化及克隆胚胎发育过程中作用的研究[D]. 张国敏.南京农业大学 2015
[2]线粒体调控原始卵泡形成的研究[D]. 华娟.中国科学技术大学 2013
[3]黄体期不同饲喂量对湖羊卵泡发育、血液理化指标和卵泡内微环境的影响[D]. 应诗家.南京农业大学 2012
[4]氧化应激对仔猪精氨酸代谢和需求特点的影响及机制研究[D]. 郑萍.四川农业大学 2010



本文编号:3648555

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