青海省硬蜱多样性及蜱传病原基因多态性研究

发布时间：2023-03-27 18:38

　　青海省是我国顶层战略部署“一带一路”和“三江源生态保护”项目中的重点区域,随着经济带和保护区的发展,人员物资的流动,蜱及蜱媒病严重威胁着人和动物的健康,研究该地区蜱种及蜱携带病原的多样性和病原基因的多态性,评估蜱传病原对生态环境和公共卫生安全影响的风险因素,为青海省及周边国家制定防控策略提供数据支撑,对深入了解我国蜱种及蜱传疫病有着深远的意义。本研究在青海省选取22个县市作为采样点,采用布旗法和人工诱捕法共采集1104只自然界游离的饥饿成蜱;通过传统形态学鉴定并结合16S rRNA、COI和ITS2基因的分子学鉴定得出有3属7种蜱,分别为青海血蜱(454/1104)、丹氏血蜱(42/1104)、西藏血蜱(2/1104)、阿坝革蜱(263/1104)、草原革蜱(246/1104)、森林革蜱(94/1104)和草原硬蜱(3/1104)。采用PCR和RLB技术对鉴定的蜱种进行无浆体(羊无浆体、边缘无浆体、牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体)、立克次体、伯氏疏螺旋体、梨形虫和蜱传新发病原(山羊无浆体、Colpodella spp.病原)的分子检测。PCR检测结果显示:羊无浆体的感染率为5.6%、牛无浆...

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要 abstract 第一章 引言
1.1 蜱分类概述
1.2 蜱传病原概述
    1.2.1 无浆体
    1.2.2 立克次体
    1.2.3 伯氏疏螺旋体
    1.2.4 梨形虫
    1.2.5 Colpodella spp.病原
    1.2.6 蜱传病原常用检测方法的研究进展
    1.2.7 研究背景、目的与意义 第二章 青海地区的蜱种多样性的调查
2.1 材料
    2.1.1 蜱虫样品
    2.1.2 试剂
    2.1.3 耗材
    2.1.4 仪器设备
2.2 方法
    2.2.1 采集地点的选择
    2.2.2 蜱虫的采集
    2.2.3 蜱虫的形态学鉴定
    2.2.4 蜱虫的分子学鉴定
    2.2.5 PCR阳性产物纯化与回收
    2.2.6 目的基因片段的克隆与测序
    2.2.7 序列和数据分析
2.3 实验结果
    2.3.1 蜱虫采集结果
    2.3.2 蜱虫形态鉴定结果
    2.3.3 蜱种分子鉴定结果
2.4 讨论 第三章 青海地区的蜱种携带病原的检测
3.1 材料
    3.1.1 DNA样品
    3.1.2 实验标准菌株
    3.1.3 试剂
    3.1.4 仪器设备
3.2 方法
    3.2.1 引物和探针的设计和合成
    3.2.2 羊无浆体的检测
    3.2.3 边缘无浆体的检测
    3.2.4 牛无浆体、嗜吞噬细胞无浆体的检测
    3.2.5 蜱传立克次体的检测
    3.2.6 蜱传伯氏疏螺旋体的检测
    3.2.7 蜱传梨形虫的检测
    3.2.8 山羊无浆体的检测
    3.2.9 Colpodella spp.病原的检测
    3.2.10 PCR阳性产物纯化与回收
    3.2.11 目的基因片段的克隆与测序
    3.2.12 序列和数据分析
    3.2.13 反向线状印迹杂交技术检测
3.3 结果
    3.3.1 羊无浆体的检测
    3.3.2 边缘无浆体的检测
    3.3.3 牛无浆体的PCR检测
    3.3.4 嗜吞噬细胞无浆体的检测
    3.3.5 蜱传立克次体的检测
    3.3.6 伯氏疏螺旋体的检测
    3.3.7 梨形虫的检测结果
    3.3.8 新发蜱传病原山羊无浆体的检测
    3.3.9 新发蜱传病原Colpodella spp.的检测
3.4 讨论
    3.4.1 无浆体
    3.4.2 立克次体
    3.4.3 伯氏疏螺旋体
    3.4.4 梨形虫
    3.4.5 新发蜱传病原 第四章 青海地区的蜱种携带病原的风险评估
4.1 材料
    4.1.1 青海地区蜱种信息的数据
    4.1.2 青海地区蜱种携带病原的数据
    4.1.3 青海地区蜱种采集地点的数据
4.2 方法
4.3 结果
    4.3.1 羊无浆体的风险评估分析
    4.3.2 牛无浆体的风险评估分析
    4.3.3 嗜吞噬细胞无浆体的风险评估分析
    4.3.4 立克次体的风险评估分析
    4.3.5 伯氏疏螺旋体的风险评估分析
    4.3.6 梨形虫的风险评估分析
    4.3.7 山羊无浆体的风险评估分析
    4.3.8 Colpodella spp.病原的风险评估分析
4.4 讨论 第五章 羊无浆体MSP1a基因多态性分析
5.1 材料
    5.1.1 蜱虫样品
    5.1.2 羊基因组样品
    5.1.3 菌株
5.2 方法
    5.2.1 引物的设计和合成
    5.2.2 全国羊样品羊无浆体的检测
    5.2.3 蜱体内和全国羊基因组中羊无浆体MSP1a基因的扩增
    5.2.4 羊无浆体MSP1a基因PCR阳性产物纯化与回收
    5.2.5 羊无浆体MSP1a基因片段的克隆与测序
    5.2.6 序列和数据分析
5.3 结果
    5.3.1 蜱样品羊无浆体MSP1a基因多态性的分析
    5.3.2 全国羊样品羊无浆体的检测结果
    5.3.3 全国羊样品羊无浆体MSP1a基因多态性的分析
5.4 讨论 第六章 全文总结 附表 参考文献 致谢 作者简介



本文编号：3772651