兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗工艺技术研究及临床试验

发布时间：2024-03-31 00:30

　　兔出血症,又称兔瘟,是由兔出血症病毒(Rabbit haemorrhagic disease virus,RHDV)引起的一种以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的兔传染病。国际兽医局将该病列为B类传染病,我国农业部第1125号公告颁布为二类疫病。目前该病的主要预防措施是使用组织灭活疫苗免疫,然而用于制作该疫苗的非免疫兔来源很不确定,同时存在由于灭活不完全而产生散毒的潜在危险,生物安全性差,需要探索新的疫苗生产途径。本研究对利用重组兔出血症病毒杆状病毒制备的兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗开展研究,进行生产工艺研究后中试生产10批次疫苗,并在农业部行政审批许可后进行了疫苗临床试验,完成中试产品安全试验、效力试验和生物安全试验,最终兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗(BAC-VP60株)获得一类新兽药证书。对重组兔出血症病毒杆状病毒进行转瓶培养和悬浮培养工艺研究。结果显示,在中试生产和规模化生产时,培养条件控制在温度27～28℃、pH值为6.0～6.2、转速15 r/min。当细胞浓度约为2×106个/mL时按总体积的1%接毒,以相同条件继续培养,连续观察5日,待细胞病变达约85%以上时,...

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１?ｃｒｙｏＥＭ重建ＲＨＤＶ病毒粒子??

?兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗工艺技术研宄及临床试验???＿擊??＾?４４?ｎｍ?＾??图１?ｃｒｙｏＥＭ重建ＲＨＤＶ病毒粒子??截至２０１０年，所有的ＲＨＤ病毒（ＲＨＤＶ）分属六个基因型（ＧＩ－ＧＶＩ），其中ＧＶＩ??是一个抗原亚型（ＲＨＤＶａ）?［１２＝１３］。在２０１０....

图２ＲＨＤＶ基因组模式图??

?第一篇文献综述???Ｇｅｎｏｍｉｃ?ＲＮＡ?（－７．４ｋｂ）??５，???．．．＂??????３，???，■守，?（Ａ）ｎ??（ｒａｎｓｌａｎ＇ｏｎ??［ｌｐ：Ｓ?［ｖｌＴａＭ?ｊ）２９?［ｙｐＴｆｉｌｉａｏ?￣￣ＭＲｐ?Ｆ?ＶＰ６０?１??ｐｉ＾?Ａ?▲?Ａ?ＡＪｋ?Ａ??（....

图３?Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ系统：重组病毒的产生和目的基因的表达??３．６ＢＥＳ的优势??

?兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗工艺技术研究及临床试验???奸料转財成幽續．?％??科?ｖ?５?Ｉ??ｒ＿？Ｃ??ｒｆｆ两財．?，－－—￣－＇—?－?—??????—?－＊？??？甚―ｉ汽ｅ??＾Ｓｆｃ．?？ｕｄ＾ｆ？８？ｆ?，??■?，?ｉ＞Ｎ＼?ｒ５３Ｔ７＾ｆ＾ｉｉｉｉ￣?....

图１－２转瓶培养细胞计数结果??Ｆｉｇ．?ｌ－２Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｂｙ?ｒｏｌｌｅｒ?ｂｏｔｔｌｅｓ??

?兔出血症病毒杆状病毒载体灭活疫苗工艺技术研究及临床试验???２．１．２不同初始浓度细胞转瓶培养??转瓶培养细胞计数也呈现与静置培养结果类似的趋势，起始浓度ｌ．〇ｘｌ〇６个／ｍＬ??和１．５ｘｌ〇６个／ｍＬ到达细胞浓度高峰的时间和最大细胞浓度均没有明显差异；在第４??日，几个起始....

本文编号：3943173