Wnt/β-catenin信号转导通路在运动防治老年骨质疏松症中的作用研究
发布时间：2023-02-10 17:28
研究背景随着社会老龄化人口的增加,骨质疏松症在全世界特别是西方发达国家的发病率正在逐渐升高,现已成为亟待解决的世界性公共卫生问题。药物治疗所产生的毒副作用使其临床应用受到一定的限制,而运动疗法作为一种非药物治疗手段可以有效防治骨质疏松症,成为了当今研究热点。然而运动防治骨质疏松症的作用机制至今尚未完全阐明。研究表明,Wnt/β-catenin信号转导通路在骨形成和成骨分化,以及防治骨质疏松症中具有非常重要的作用。但Wnt/β-catenin信号转导通路是否在运动防治骨质疏松症中占有重要作用还未有相关研究,且不同的运动强度和运动时间在防治骨质疏松症上的效果也不尽相同。因此,本研究将使用老年骨质疏松小鼠(SAMP6)作为动物模型,采用跑台运动干预手段,研究不同强度和时间跑台运动对SAMP6小鼠的骨形态计量学和Wnt/β-catenin信号转导通路的影响。同时,本研究还采用机械应力刺激(压应力和牵张力)对MC3T3-E1成骨细胞进行干预,观察机械应力对成骨细胞分化及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响。从而验证“运动/机械应力——Wnt/β-catenin信号转导通路——促骨重塑/成...
【文章页数】：115 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词
绪论
文献综述 运动防治骨质疏松症的机制概述以及机械应力对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
第一部分 不同强度和时间跑台运动对老年骨质疏松小鼠(SAMP6)骨形成和Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
前言
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组
1.2 主要实验仪器
1.3 主要实验试剂
1.4 实验方法
1.4.1 实验步骤
1.4.2 小鼠跑台运动方案
1.4.3 取材
1.4.4 检测指标及方法
1.4.5 统计学分析
2 结果
2.1 小鼠胫骨骨形态计量学结果
2.1.1 运动对SAMP6小鼠骨小梁形态计量学的影响
2.1.2 运动对SAMP6小鼠皮质骨形态计量学的影响
2.2 运动对小鼠胫骨Wnt1、LRP5和β-cateninmRNA表达的影响
2.3 运动对各组小鼠血清ALP、OCN和PTH水平的影响
3 讨论
3.1 老年骨质疏松症模型的建立及Wnt/β-catenin信号转导通路的变化
3.2 不同运动强度对SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
3.3 不同运动时间对SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
4 小结
第二部分 机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞的分化及Wnt/β-catenin信号的影响
前言
1 材料和方法
1.1 主要仪器
1.2 主要试剂及配置
1.3 方法
1.3.1 研究方案示意图(图2-1)
1.3.2 细胞培养
1.3.3 3 D细胞混凝柱的制备
1.3.4 细胞加压实验
1.3.5 碱性磷酸酶(ALP)活性测定
1.3.6 Real-timePCR检测成骨细胞分化相关基因(ALP、OCN、Runx2、OSX)以及Wnt/β-catenin信号转导通路关键因子LRP5,SOST的mRNA的表达
1.3.7 Westenblot检测细胞成骨细胞Wnt1、DVL2、β-catenin和磷酸化β-catenin(p-β-catenin)的蛋白表达水平
1.3.8 统计分析
2 结果
2.1 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响
2.2 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨分化关键因子表达的影响
2.3 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
3 讨论
3.1 不同强度机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.2 不同时间机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.3 不同强度和时间机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通路影响
4 小结
第三部分 机械牵张力对MC3T3-E1成骨细胞分化及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
前言
1 材料与方法
1.1 主要仪器
1.2 主要试剂
1.3 方法
1.3.1 细胞培养
1.3.2 施加牵张应力
1.3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性测定
1.3.4 Real-timePCR检测
1.3.5 Westernblot检测成骨细胞的Wnt1、β-catenin、P-β-catenin蛋白表达情况
1.3.6 流式细胞仪检测细胞凋亡水平
1.3.7 统计学分析
2 结果
2.1 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响
2.2 不同强度和时间机械牵应力对MC3T3-E1成骨细胞分化关键因子OCN、Runx2和OsterixmRNA表达的影响
2.3 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通的影响
2.4 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响
3 讨论
3.1 不同强度机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.2 不同时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.3 不同强度和时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin的影响
3.4 不同强度和时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响
4.小结
全文总结
研究主要创新之处及展望
1.创新之处
2.局限性及展望
参考文献
本科到研究到研究生学习经历
攻读学位期间的科研成果
资助声明
致谢
本文编号：3739599
【文章页数】：115 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
中英文缩略词
绪论
文献综述 运动防治骨质疏松症的机制概述以及机械应力对Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
第一部分 不同强度和时间跑台运动对老年骨质疏松小鼠(SAMP6)骨形成和Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
前言
1 材料和方法
1.1 实验动物及分组
1.2 主要实验仪器
1.3 主要实验试剂
1.4 实验方法
1.4.1 实验步骤
1.4.2 小鼠跑台运动方案
1.4.3 取材
1.4.4 检测指标及方法
1.4.5 统计学分析
2 结果
2.1 小鼠胫骨骨形态计量学结果
2.1.1 运动对SAMP6小鼠骨小梁形态计量学的影响
2.1.2 运动对SAMP6小鼠皮质骨形态计量学的影响
2.2 运动对小鼠胫骨Wnt1、LRP5和β-cateninmRNA表达的影响
2.3 运动对各组小鼠血清ALP、OCN和PTH水平的影响
3 讨论
3.1 老年骨质疏松症模型的建立及Wnt/β-catenin信号转导通路的变化
3.2 不同运动强度对SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
3.3 不同运动时间对SAMP6小鼠骨形成及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
4 小结
第二部分 机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞的分化及Wnt/β-catenin信号的影响
前言
1 材料和方法
1.1 主要仪器
1.2 主要试剂及配置
1.3 方法
1.3.1 研究方案示意图(图2-1)
1.3.2 细胞培养
1.3.3 3 D细胞混凝柱的制备
1.3.4 细胞加压实验
1.3.5 碱性磷酸酶(ALP)活性测定
1.3.6 Real-timePCR检测成骨细胞分化相关基因(ALP、OCN、Runx2、OSX)以及Wnt/β-catenin信号转导通路关键因子LRP5,SOST的mRNA的表达
1.3.7 Westenblot检测细胞成骨细胞Wnt1、DVL2、β-catenin和磷酸化β-catenin(p-β-catenin)的蛋白表达水平
1.3.8 统计分析
2 结果
2.1 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响
2.2 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨分化关键因子表达的影响
2.3 不同强度和时间的机械压应力对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
3 讨论
3.1 不同强度机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.2 不同时间机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.3 不同强度和时间机械压应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通路影响
4 小结
第三部分 机械牵张力对MC3T3-E1成骨细胞分化及Wnt/β-catenin信号转导通路的影响
前言
1 材料与方法
1.1 主要仪器
1.2 主要试剂
1.3 方法
1.3.1 细胞培养
1.3.2 施加牵张应力
1.3.3 碱性磷酸酶(ALP)活性测定
1.3.4 Real-timePCR检测
1.3.5 Westernblot检测成骨细胞的Wnt1、β-catenin、P-β-catenin蛋白表达情况
1.3.6 流式细胞仪检测细胞凋亡水平
1.3.7 统计学分析
2 结果
2.1 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞ALP活性的影响
2.2 不同强度和时间机械牵应力对MC3T3-E1成骨细胞分化关键因子OCN、Runx2和OsterixmRNA表达的影响
2.3 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin信号转导通的影响
2.4 不同强度和时间机械牵张应力对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响
3 讨论
3.1 不同强度机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.2 不同时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞分化的影响
3.3 不同强度和时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞Wnt/β-catenin的影响
3.4 不同强度和时间机械牵张应力刺激对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响
4.小结
全文总结
研究主要创新之处及展望
1.创新之处
2.局限性及展望
参考文献
本科到研究到研究生学习经历
攻读学位期间的科研成果
资助声明
致谢
本文编号：3739599
本文链接：https://www.wllwen.com/shoufeilunwen/sklbs/3739599.html