ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其作用机制的研究

发布时间：2016-11-05 18:00

  本文关键词：ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其作用机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

《第三军医大学》 2015年

ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其作用机制的研究

李崇义  

【摘要】：背景肝细胞性肝癌(HCC)是肝脏最常见的原发恶性肿瘤,具有较高的发病率和致死率。由于其容易转移复发的特点,HCC患者常表现为预后不良。因此,我们需要进一步研究肝细胞性肝癌的分子生物学机制,为其诊断和治疗提供新的策略。含I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5),与基质金属蛋白酶(MMP)和解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAM)同属Zn2+依赖的金属蛋白酶家族。其异常表达在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。关于其蛋白结构的研究显示,ADAMTS5除具有蛋白聚糖酶的活性外,更具有抗血管生成的作用。因此研究ADAMTS5在HCC中的表达及其作用机制具有重要意义。rs2830585是位于编码ADAMTS5的TSP重复序列1(TSR1)结构域的基因序列中的非同义单核苷酸多态性位点(nsSNP),SNPs3D软件预测结果显示rs2830585可通过改变蛋白质的氨基酸序列从而影响ADAMTS5的功能,而TSR1结构域是ADAMTS5发挥抗血管生成活性的关键。因此,对于以丰富肿瘤血管生成为重要特征的的肝细胞性肝癌,研究ADAMTS5 rs2830585单核苷酸多态性与肝细胞性肝癌肿瘤易感性之间的关系具有重要意义。目的1、检测ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达情况及其与临床病理因素之间的关系。2、阐明ADAMTS5在肝细胞性肝癌发生、发展中的作用机制。3、明确ADAMTS5 rs2830585单核苷酸多态性与肝细胞性肝癌肿瘤易感性之间的关系。方法第一部分ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其意义1、采用肝细胞性肝癌组织芯片及免疫组化,检测肝细胞性肝癌组织中ADAMTS5、血管内皮生长因子(VEGF)、CD34的表达。2、采用McNemar检验比较ADAMTS5在肝细胞性肝癌癌组织及癌周正常组织的表达差异。3、采用卡方检验或fisher精确概率检验比较adamts5的表达与临床病理因素之间的相关性。4、采用spearman等级相关系数比较adamts5、vegf、微血管密度(mvd)和肿瘤体积的相关性。5、采用生存分析比较adamts5的表达与患者总生存时间的关系。6、采用westernblot检测adamts5在正常肝细胞系与不同hcc细胞系中的表达。第二部分adamts5在血管形成中的作用及其机制1、通过构建高表达adamts5的肝细胞性肝癌细胞系及酶联免疫吸附测定法(elisa),确定肝细胞性肝癌中adamts5的表达对vegf分泌的影响。2、通过huvec细胞迁移和管状形成实验,检测肝细胞性肝癌细胞条件培养基对huvec细胞迁移和管状形成的影响。3、通过移植物成瘤实验,进一步在体内确定adamts5对肝细胞性肝癌肿瘤生长及血管生成的影响。第三部分adamts5单核苷酸多态性与中国汉族人群肝细胞癌易感性的研究1、收集220例肝细胞性肝癌患者和220例非肝细胞性肝癌对照患者临床资料,并进行随访。2、经知情同意,提取患者外周血dna,针对rs2830585单核苷酸多态性位点进行进行基因测序。3、使用spss19.0统计学软件进行统计学分析。结果第一部分adamts5在肝细胞性肝癌中的表达及其意义1、adamts5在肝细胞性肝癌癌组织中的表达显著低于癌周正常肝组织(mcnemar检验,p0.05)2、adamts5的表达与肿瘤分期显著相关(p0.01)。3、肝细胞性肝癌组织中adamts5的表达与mvd(r=-0.530,p0.001)、vegf(r=-0.640,p0.001)及肿瘤体积(r=-0.361,p0.05)显著负相关。4、adamts5阳性表达肝细胞性肝癌患者总生存时间显著优于阴性表达adamts5患者(29.56versus12.96,p0.001),adamts5可作为独立的预后因子预测肝细胞性肝癌患者的总生存时间(p0.05)。5、ADAMTS5在正常肝细胞系L02中的表达高于肝细胞性肝癌细胞系。第二部分ADAMTS5在血管形成中的作用及其机制1、高表达ADAMTS5肝细胞性肝癌细胞条件培养基中VEGF的表达显著低于其对照组细胞条件培养基(p0.001)。2、与对照组细胞条件培养基相比较,高表达ADAMTS5肝细胞性肝癌细胞条件培养基可显著抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)迁移和管状形成能力(p0.01),并且人重组VEGF可以从很大程度上恢复HUVEC细胞被抑制的迁移和管状形成能力(p0.01)。3、高表达ADAMTS5肝细胞性肝癌细胞裸鼠移植瘤生长受到显著抑制(p0.01),免疫组化结果显示ADAMTS5在裸鼠移植瘤中的高表达抑制了肿瘤内的血管形成和VEGF表达。第三部分ADAMTS5单核苷酸多态性与中国汉族人群肝细胞癌易感性的研究1、Logistic回归分析结果显示,与rs2830585 G等位基因相比,A等位基因显著降低肝细胞性肝癌发生风险(adjusted OR,0.348;95%CI 0.236-0.512;P0.001);携带rs2830585 GA基因型的个体发生肝细胞性肝癌风险显著低于GG基因型携带者(adjusted OR,0.339;95%CI,0.044-11.535;P0.001)。2、分层分析结果显示,rs2830585基因型与分层因素之间不存在显著交互作用。3、相关性分析结果显示,rs2830585基因型与肝细胞性肝癌临床病理因素间不存在显著相关性。结论1、ADAMTS5在肝细胞性肝癌中表达下调,其高表达与肝细胞性肝癌患者的良好预后相关。2、ADAMTS5通过减少肝细胞性肝癌中VEGF的分泌,抑制肿瘤血管生成及生长。3、ADAMTS5 rs2830585与肝细胞性肝癌的易感性显著相关,其突变型等位基因A显著降低肝细胞性肝癌的发病风险。

【关键词】：
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

下载全文 更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？ 欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 苗艳艳;孔心涓;田字彬;;原发性肝癌危险因素及其致癌机制的研究进展[J];青岛大学医学院学报;2012年01期

2 王利;王宪;孔炜;;新型金属蛋白酶ADAMTS家族的研究进展[J];生理科学进展;2008年01期

3 王乐;李胜棉;;ADAMTS家族对肿瘤作用的研究进展[J];实用癌症杂志;2013年02期

4 李春海,李克勤;肿瘤微血管生成的机制与肿瘤侵袭和转移[J];中华肿瘤杂志;2000年03期

5 王璇;侯建青;;血管生成调控因子与肿瘤生长及治疗的研究进展[J];中国老年学杂志;2009年16期

6 Yoji Kishi;Kazuaki Shimada;Satoshi Nara;Minoru Esaki;Tomoo Kosuge;;Role of hepatectomy for recurrent or initially unresectable hepatocellular carcinoma[J];World Journal of Hepatology;2014年12期

7 Javier Tejeda-Maldonado;Ignacio García-Juárez;Jonathan Aguirre-Valadez;Adrián González-Aguirre;Mario Vilatobá-Chapa;Alejandra Armengol-Alonso;Francisco Escobar-Penagos;Aldo Torre;Juan Francisco Sánchez-ávila;Diego Luis Carrillo-Pérez;;Diagnosis and treatment of hepatocellular carcinoma: An update[J];World Journal of Hepatology;2015年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 刘志才,管福顺,郭建庄,崔文涛,王振海,王富强;食管贲门癌脉管瘤栓与病理相关因素分析[J];癌症;2002年05期

2 王业忠;彭心宇;徐启武;刘祺;李锋;李洪安;;uPA和VEGF在脑膜瘤、胶质瘤、脑转移癌中的表达及意义[J];中国神经肿瘤杂志;2005年01期

3 李斌;陈武科;陈鹏;廖和和;;乳腺癌中MTA1、MMP-9表达与临床病理研究[J];重庆医学;2010年12期

4 马可心;罗辉;;乳腺癌彩色多普勒血流表现与组织中VEGF-C表达的相关分析[J];当代医学;2012年12期

5 曾建华;钟玲;徐波;;地塞米松对宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用[J];第三军医大学学报;2008年13期

6 董济民,呼晓荣,孙埃雄,何积银,李秀霞;非小细胞肺癌组织中血小板反应素的表达和血管生成的关系[J];第四军医大学学报;2004年24期

7 陈绍勤,许东坡,戴起宝,叶建新,曲丽娟;结直肠癌和同时性肝转移灶转化生长因子β_1的表达[J];福建医科大学学报;2003年01期

8 杜滂,魏经国;VEGF及其受体的表达与肝癌的生物学特性关系[J];放射学实践;2002年06期

9 黄文成;陈闯;潘泓;朱波;黄玲莎;陈铃;刘志辉;李晖;劳明;;肺癌患者血清中相关物质群的水平[J];广西医科大学学报;2006年03期

10 肖琳;;乳腺癌中MTA1与MMP-9的临床病理观察[J];中国医药科学;2011年01期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 吴秋玲;水蛭、斑蝥对肿瘤血管生成及VEGF、MMP表达的影响[D];湖北中医药大学;2011年

2 蒋代凤;肺癌转移相关蛋白的比较蛋白质组分析，鉴定及候选蛋白IL-18促进肺癌细胞转移的功能鉴定[D];重庆医科大学;2002年

3 王举;Survivin在原发性肝癌中的表达及其靶向反义寡核苷酸对肝癌细胞的影响[D];吉林大学;2004年

4 郝强;胰腺癌CT灌注成像和血管生成的临床研究[D];第二军医大学;2004年

5 任方远;肾细胞癌CT灌注成像和血管生成的临床研究[D];第二军医大学;2006年

6 张慧娟;小鼠囊胚及围植入期子宫内膜对人卵巢癌细胞侵袭转移的影响[D];天津医科大学;2006年

7 李颖智;骨巨细胞瘤蛋白质组学初步研究及临床诊断研究[D];吉林大学;2006年

8 李爱玲;乳腺癌血管新生的细胞周期蛋白调控及蛋白质光学芯片临床应用的探索[D];中国协和医科大学;2003年

9 吕卫国;早期子宫颈鳞癌盆腔淋巴转移相关因素的研究[D];浙江大学;2007年

10 梁秦川;Basigin/CD147在人神经胶质瘤侵袭中的作用机制及其反义RNA抑制神经胶质瘤侵袭的实验研究[D];第四军医大学;2007年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 柳忠兴;CD147和Survivin在骨巨细胞瘤中的表达及其临床意义[D];泰山医学院;2010年

2 庄莹莹;丹参酮ⅡA对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡及MMP-2、VEGF表达的影响[D];兰州大学;2011年

3 王玉婷;恶性实体瘤患者凝血功能相关指标检测的临床意义[D];新疆医科大学;2011年

4 冯艳丽;中晚期非小细胞肺癌患者血瘀证与相关症状及部分实验室指标的关联性研究[D];中国中医科学院;2011年

5 刘海建;OPN、uPA及MMP-9的蛋白表达与垂体腺瘤侵袭性关系的研究[D];河北大学;2011年

6 应春芝;肺癌患者血浆纤维蛋白原和D-二聚体变化及其介入治疗的影响[D];山东大学;2011年

7 杜滂;人肝癌细胞原位种植裸鼠肝脏后血管造影表现与VEGF及其受体的表达[D];第四军医大学;2001年

8 李文凤;腋淋巴结阴性乳腺癌中血管生成及nm23基因表达与预后关系的临床研究[D];青岛大学;2001年

9 张晓暾;单克隆抗体E9检测胃癌组织中CD105的表达及其意义[D];青岛大学;2001年

10 孙韬;原发小细胞肺癌患者化疗前后证候特征研究[D];北京中医药大学;2002年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵炜;高洪梅;刘世国;赵洁;王修海;;人肝癌组织中nm23-H1基因突变的检测及意义[J];青岛大学医学院学报;2007年01期

2 ;Downstaging followed by resection plays a role in improving prognosis of unresectable hepatocellular carcinoma[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2004年04期

3 马臻;陈国民;;HBV X蛋白和HCV核心蛋白在肝癌发生中的作用[J];国际肿瘤学杂志;2006年06期

4 梁恒秋;余红平;谭盛葵;;原发性肝癌危险因素病例对照的非条件Logistic回归分析[J];广西医科大学学报;2007年06期

5 王利;王宪;孔炜;;新型金属蛋白酶ADAMTS家族的研究进展[J];生理科学进展;2008年01期

6 叶小华;郜艳晖;张敏;徐英;;HBV感染与肝癌关系的Meta分析[J];数理医药学杂志;2007年06期

7 唐莹;阮永华;;MMP-2、MMP-9与肺癌及肺纤维化的研究进展[J];实用癌症杂志;2009年01期

8 孟冠敏;徐立红;;微囊藻毒素的毒性效应与蛋白磷酸酶2A[J];中国细胞生物学学报;2010年01期

9 裴广军;付莉;崔亚玲;陆维权;;中国人群饮酒与原发性肝癌关系的Meta分析[J];现代预防医学;2008年14期

10 王子锡;;P53基因在肝癌发生中的作用新进展[J];右江医学;2010年02期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 Tarantino L;Francica G;Esposito F. ;赵双;;经皮行肝细胞性肝癌消融后的种植转移:彩色多普勒超声检查结果[J];世界核心医学期刊文摘(胃肠病学分册);2006年04期

2 孙文兵;;用先进理念引领肝细胞性肝癌的诊断和治疗[J];中国临床医生;2008年12期

3 孟红宇;;乙型肝炎病毒感染与肝细胞性肝癌临床研究[J];中外医疗;2009年12期

4 何淑霞;;乙型肝炎病毒感染与肝细胞性肝癌的临床关系[J];医药论坛杂志;2010年20期

5 邓卓霖，潘朗星，马韵;肝细胞性肝癌P~（53）基因多态性定点突变[J];广西科学;1995年04期

6 苏卫贤;肝细胞性肝癌手术切除的预后分析[J];河南肿瘤学杂志;1995年02期

7 张冲,张金山,黄威权,苗继延;5-羟色胺及其受体与人肝细胞性肝癌增殖的关系[J];中华肝脏病杂志;2000年06期

8 陈立章 ,莫显昆 ,范学工;肝细胞性肝癌的危险因素[J];中国医师杂志;2002年12期

9 蔡秀军,洪玉才,王先法;人肝细胞性肝癌性激素受体的表达[J];肝胆外科杂志;2002年05期

10 沈正荣,彭淑牖;复发性肝细胞性肝癌的处理[J];浙江临床医学;2002年10期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 林满霞;徐辉雄;谢晓燕;吕明德;徐作锋;刘广健;谢哓华;陈立达;;肝细胞性肝癌超声造影参数成像临床应用研究[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年

2 洪德飞;刘颖斌;彭淑牖;黄东胜;孙晓东;王知非;成剑;沈国梁;张远标;;肝尾状叶肝细胞性肝癌破裂出血的处理策略[A];2013年浙江省外科学学术年会论文汇编[C];2013年

3 李龙浩;郑进方;刘秉彦;符少清;吴宁;;彩超观察肝癌经肝动脉栓塞化疗前后门静脉血供的变化[A];中国超声医学工程学会第八届全国腹部超声学术会议论文汇编[C];2010年

4 钟红;陈胜利;杜薇云;黄子诚;吴戴红;;肝细胞性肝癌肝静脉下腔静脉右心房瘤栓的超声诊断[A];中华医学会第六次全国超声医学学术年会论文汇编[C];2001年

5 郭晓东;孟园;熊璐;周光德;赵雨来;刘树红;赵景民;;VEGF和p53在肝细胞性肝癌组织中的异常表达与预后的关系[A];第八届全国生物医学体视学学术会议、第十一届全军军事病理学学术会议、第七届全军定量病理学学术会议论文（摘要）汇编[C];2012年

6 彭传会;周琳;郑树森;;ZDHHC2在肝细胞性肝癌中的表达分析及其质粒构建和功能鉴定[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

7 邱历伟;姚登福;吴信华;吴玮;苏小琴;邹黎;;肝癌组织IGF-Ⅱ表达与HBV DNA复制及病理学特征的研究[A];第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议论文汇编[C];2006年

8 黄建国;;乳腺癌肝转移与肝细胞性肝癌超声造影特性的分析[A];中华医学会第十三次全国超声医学学术会议论文汇编[C];2013年

9 顾劲扬;丁义涛;;非肝细胞性肝癌肝移植的研究进展[A];2013中国器官移植大会论文汇编[C];2013年

10 刘圣;施海彬;王杰;冯耀良;杨正强;戴曦;李麟荪;;α-氰基丙烯酸正丁酯栓塞治疗肝细胞性肝癌并肝动脉门静脉瘘的临床价值[A];中华医学会第16次全国放射学学术大会论文汇编[C];2009年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 李崇义;ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其作用机制的研究[D];第三军医大学;2015年

2 李晓丽;不同葡萄糖、胰岛素水平对人肝细胞性肝癌生长作用研究[D];郑州大学;2012年

3 刘宏;人内皮抑素基因转染治疗肝细胞性肝癌的实验研究[D];浙江大学;2005年

4 李亮;循环miR-429在肝细胞性肝癌早期预警及诊断中的作用和机制研究[D];第二军医大学;2012年

5 花瞻;复发肝细胞性肝癌相关基因的研究[D];中国协和医科大学;2004年

6 张斌;蜈蚣提取液的分离纯化与治疗肝细胞性肝癌机制的研究[D];中南大学;2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 马华星;Kindlin-1在肝细胞性肝癌中的表达作用及其临床意义[D];安徽医科大学;2015年

2 刘霖;端粒酶基因多态性与肝细胞性肝癌预后的相关性分析[D];昆明医科大学;2015年

3 黄涛;肝细胞性肝癌TACE术后影响疗效的多因素分析[D];四川医科大学;2015年

4 池俊萌;2型糖尿病对肝细胞性肝癌发病的影响[D];重庆医科大学;2011年

5 周宁;高尔基蛋白73（Golgi protein 73）在肝细胞性肝癌中的表达[D];中南大学;2011年

6 洪玉才;性激素受体在肝细胞性肝癌中表达的研究[D];浙江大学;2002年

7 邹浩;靶向性融合基因对人肝细胞性肝癌治疗作用的体外研究[D];昆明医学院;2005年

8 李悦国;肝细胞性肝癌患者血清蛋白质指纹图谱检测及其临床意义[D];天津医科大学;2006年

9 孙磊;肝细胞性肝癌肝动脉门静脉分流形成的相关因素分析[D];南京医科大学;2012年

10 虞长春;肝细胞性肝癌中环氧化酶-2的表达及其与细胞凋亡的关系[D];安徽医科大学;2007年

  本文关键词：ADAMTS5在肝细胞性肝癌中的表达及其作用机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：165567