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北桑寄生内生真菌的分离鉴定及Alternaria alternata次级代谢产物研究

发布时间:2021-12-31 22:34
  目的:分离纯化药用植物北桑寄生的内生真菌,对其进行形态学和分子生物学鉴定;筛选氧化自由基清除能力较强和抑菌效果较好的高活性菌株;大规模发酵活性菌株获得其乙酸乙酯部分提取物,对活性菌株的次级代谢产物进行分离及鉴定以及活性分析,为北桑寄生内生真菌资源的开发和利用提供参考依据。方法:(1)设置不同消毒时间和不同浓度的次氯酸钠溶液对北桑寄生叶片进行表面消毒处理,采用组织块法分离北桑寄生内生真菌,菌丝尖端挑取法对其进行纯化,利用形态学结合ITS序列比对鉴定内生真菌。(2)小规模液体发酵北桑寄生内生真菌,乙酸乙酯萃取内生真菌发酵液,减压浓缩得提取物,测定其DPPH自由基清除活性和ABTS+自由基清除活性。(3)进一步筛选具有抑菌活性的菌株,采用滤纸片琼脂扩散法进行抑菌活性菌株的初筛,96孔板法测定初筛后具有抑菌活性菌株的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。(4)对活性菌株进行大规模的液体发酵培养,采用柱色谱等方法分离其次级代谢产物,运用波谱学对单体化合物进行结构鉴定,测定单体化合物的抗氧化活性和抑菌活性。结果:(1)北桑寄生叶片消毒条件为:75%的乙醇浸泡消毒1 ... 

【文章来源】:山西医科大学山西省

【文章页数】:58 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

北桑寄生内生真菌的分离鉴定及Alternaria alternata次级代谢产物研究


北桑寄生(左图)及其叶片(右图)

自由基,内生真菌,产物,清除率


山西医科大学硕士学位论文16图2-1结果表明,样品浓度在0.02~0.2mg/mL时,北桑寄生内生真菌BS06、BS07、BS27的发酵液提取物对DPPH自由基清除率为19.06%~95.17%,内生真菌BS27的发酵产物对DPPH自由基的清除能力较好,浓度为0.2mg/mL时,清除率达到95.17%,接近于同等浓度下Vc对DPPH自由基的清除能力。图2-1内生真菌发酵产物对DPPH自由基的清除活性2.2ABTS+自由基清除结果图2-2结果表明,样品浓度在0.02~0.2mg/mL时,北桑寄生内生真菌BS06、BS07、BS27的发酵液提取物对ABTS+自由基清除率为7.23%~50.05%,内生真菌BS27的发酵产物对ABTS+自由基的清除能力较好,浓度为0.2mg/mL时,清除率达到50.05%。图2-2内生真菌发酵产物对ABTS+自由基的清除活性

内生真菌,自由基,产物,清除率


山西医科大学硕士学位论文16图2-1结果表明,样品浓度在0.02~0.2mg/mL时,北桑寄生内生真菌BS06、BS07、BS27的发酵液提取物对DPPH自由基清除率为19.06%~95.17%,内生真菌BS27的发酵产物对DPPH自由基的清除能力较好,浓度为0.2mg/mL时,清除率达到95.17%,接近于同等浓度下Vc对DPPH自由基的清除能力。图2-1内生真菌发酵产物对DPPH自由基的清除活性2.2ABTS+自由基清除结果图2-2结果表明,样品浓度在0.02~0.2mg/mL时,北桑寄生内生真菌BS06、BS07、BS27的发酵液提取物对ABTS+自由基清除率为7.23%~50.05%,内生真菌BS27的发酵产物对ABTS+自由基的清除能力较好,浓度为0.2mg/mL时,清除率达到50.05%。图2-2内生真菌发酵产物对ABTS+自由基的清除活性

【参考文献】:
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本文编号:3561114

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