七叶树七叶皂苷合成途径中相关酰基转移酶候选基因的初步研究

发布时间：2022-02-24 09:32

　　七叶树（Aesculus chinensis Bge.）又被称为娑罗树,为七叶树科七叶树属落叶乔木,在中国分布广泛。七叶皂苷作为中药娑罗子主要活性成分,具有极高的药用价值,可用于治疗脑出血、脑水肿、呼吸系统疾病等。七叶皂苷是七叶树三萜类合成途径中十分重要的代谢产物,由原七叶皂苷元经多步糖基化和酰基化而形成,后期的修饰直接关联到该化合物的药用活性。特别是酰基转移酶参与的酰基化修饰,催化激活的酰基由供体转移至受体上。本研究基于七叶皂苷（A、B）在七叶树不同组织含量数据、转录组数据及同源类比分析,筛选参与七叶皂苷合成途径中高表达酰基转移酶,对候选的酰基转移酶编码基因进行表达分析和重组蛋白纯化,以揭示酰基转移酶在七叶皂苷合成途径中的作用,为三萜类有效成分合成机制的阐明提供理论基础。本研究取得如下结果:1.LC-MS定量分析七叶皂苷（A、B）在七叶树不同组织含量七叶皂苷（A、B）在七叶树各组织中含量分布不均,主要分布于花和种子。对花、种子中七叶皂苷A含量数据进行t检验,P<0.01,种子中含量明显高于花,两者差异极显著;对花、种子中七叶皂苷B含量数据进行t检验,P<0.01,种子中含... 

【文章来源】：淮北师范大学安徽省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 七叶皂苷的重要性
    1.2 酰基转移酶研究进展
        1.2.1 概念
        1.2.2 BAHD家族
        1.2.3 SCPL家族
    1.3 酰基转移酶的生理学功能
    1.4 研究的目的、内容及意义
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 研究内容
        1.4.3 研究意义
第二章 七叶树中七叶皂苷(A、B)、原七叶皂苷元成分分析和含量测定
    2.1 前言
    2.2 材料与方法
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验方法
    2.3 结果与分析
第三章 七叶树转录组测序及酰基转移酶基因筛选
    3.1 前言
    3.2 材料与方法
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验方法
    3.3 结果与分析
        3.3.1 基于RNA-seq筛选基因
        3.3.2 同源类比分析注释出的筛选基因依据
        3.3.3 候选基因在七叶树各组织不同时期中q-PCR表达结果
        3.3.4 七叶树七叶皂苷合成途径中相关酰基转移酶基因的克隆
    3.4 讨论与小结
        3.4.1 讨论
        3.4.2 小结
第四章 七叶树相关酰基转移酶体外表达纯化
    4.1 前言
    4.2 材料与方法
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验方法
    4.3 结果与分析
        4.3.1 重组质粒核酸电泳检测
        4.3.2 原核系统融合蛋白电泳检测
第五章 总结与展望
    5.1 总结
    5.2 展望
参考文献
附录
攻读硕士学位期间出版或发表的论著、论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]娑罗子中有效成分的药理学及临床应用[J]. 杨名,裴晓华.  世界中医药. 2017(12)
[2]小剂量甘露醇联合七叶皂苷钠治疗脑水肿的临床效果观察[J]. 朱理治.  河南医学研究. 2016(01)
[3]中药娑罗子的现代研究进展[J]. 李珊,马玲云,李向日,程显隆,魏锋,马双成,林瑞超.  亚太传统医药. 2012(08)
[4]珍稀观赏树种七叶树的研究现状与展望[J]. 李鹏丽,时明芝,王绍文.  北方园艺. 2009(09)
[5]娑罗子提取物对实验小鼠胃肠道的保护作用研究[J]. 姜丽岳,傅风华,于昕,孙芳.  时珍国医国药. 2008(10)
[6]七叶皂苷钠治疗肘关节损伤所致肢体肿胀的临床研究[J]. 杨路德,席平昌,张先龙.  中国中医骨伤科杂志. 2008(10)
[7]β-七叶皂苷钠对大鼠脑出血模型脑水肿治疗作用的超微结构研究[J]. 胡璘媛,樊永平,孙异临,赵性泉.  电子显微学报. 2008(03)
[8]脊髓牵拉损伤后七叶皂苷钠对细胞凋亡的抑制作用[J]. 宫明智,张佐伦,刘中浩,张丽,邢德国,王若义,武士清,张建平.  中华创伤杂志. 2006(05)
[9]七叶树的开发利用[J]. 陈西仓,张振纲.  特种经济动植物. 2003(04)
[10]β-七叶皂苷钠的抗肿瘤作用研究[J]. 郭维,徐波,杨秀伟,刘倩,崔景荣.  中国药理学通报. 2003(03)

硕士论文
[1]一个BAHD酰基转移酶对拟南芥萜类合成和盐耐受作用的研究[D]. 彭晓曦.华中农业大学 2013



本文编号：3642453