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致病疫霉诱导下HT-6抑菌物质的初步分析及防病作用

发布时间:2023-02-08 16:08
  马铃薯(Solanum tuberosum L.)作为重要的粮食作物,因其耐寒、耐旱、易储存、营养价值丰富且能预防高血压、糖尿病等特点,在全世界范围内有广泛的种植。但是马铃薯晚疫病(Potato late blight)的流行和频发,成为马铃薯生产的一个重要障碍。由致病疫霉(Phytophthora infestans)引起的马铃薯晚疫病每年给全球带来高达70亿美元的损失,而我国因晚疫病发生造成的损失亦达到17亿美元左右。当前,生产中主要利用甲霜灵等化学药剂或者选育抗病品种来防治晚疫病,但由于化学农药带来的环境问题和漫长的品种选育过程,使得许多学者逐渐意识到生物防治的重要性。目前研究发现细菌、真菌和放线菌等均能对致病疫霉生长产生强烈的抑制作用。不同种类的拮抗菌产生的抑菌物质不同,即使同一类拮抗菌,其中不同的菌株产生的抑菌物质也可能不同,如短小芽孢杆菌产生的溶杆菌素、枯草芽孢杆菌WL2产生的脂肽物质Iturin A和Surfactin均对致病疫霉菌丝生长具有良好的抑制效果。拮抗菌不仅可以产生抑菌物质抑制致病疫霉的生长,还可以增强马铃薯植株体内的抗性酶活,提升马铃薯的抗病性而不易感染晚疫病...

【文章页数】:77 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 马铃薯晚疫病
        1.1.1 病害症状
        1.1.2 病原菌的形态特征
        1.1.3 病原菌的繁殖方式和生活史
    1.2 马铃薯晚疫病的防治措施
        1.2.1 农业防治
        1.2.2 抗病品种的选育
        1.2.3 化学防治
        1.2.4 生物防治
    1.3 微生物共培养
        1.3.1 协同代谢作用
        1.3.2 竞争抑制作用
        1.3.3 诱导作用
    1.4 本研究的目的及意义
第二章 致病疫霉对HT-6产生抑菌物质的诱导及其阻断
    2.1 试验材料
        2.1.1 供试菌株
        2.1.2 供试培养基
        2.1.3 试验仪器
        2.1.4 试验试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 HT-6经LBL培养后抑制致病疫霉菌丝生长的检测
        2.2.2 HT-6经RL培养后抑制致病疫霉菌丝生长的检测
        2.2.3 HT-6 菌液对致病疫霉菌丝形态的影响
        2.2.4 单独培养HT-6 菌株后胞内及胞壁物质的抑菌作用测定
        2.2.5 HT-6 菌株的抑菌物质是否为挥发性气体的确定
        2.2.6 对峙培养不同时间后抑菌带中无菌体琼脂块抑菌作用的测定
        2.2.7 对峙培养后抑菌带中不同数量无菌体琼脂块抑菌作用的测定
        2.2.8 不同试剂阻断HT-6 产生抑菌物质的检测
        2.2.9 统计分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 HT-6经LBL培养后抑制致病疫霉菌丝生长的验证
        2.3.2 HT-6经RL培养后抑制致病疫霉菌丝生长的验证
        2.3.3 HT-6 菌液对致病疫霉菌丝形态的影响
        2.3.4 单独培养HT-6 后胞内及胞壁物质对致病疫霉菌丝生长的抑制作用
        2.3.5 HT-6 菌株的抑菌物质是否为挥发性物质的确定
        2.3.6 对峙培养不同时间抑菌带中无菌体琼脂块的抑菌作用
        2.3.7 对峙培养后抑菌带中不同数量无菌体琼脂块的抑菌作用
        2.3.8 不同试剂对HT-6 产生抑菌物质的阻断效果
    2.4 讨论
    2.5 小结
第三章 致病疫霉诱导后HT-6抑菌物质的浸提及抑菌防病作用
    3.1 试验材料
        3.1.1 供试菌株
        3.1.2 供试培养基
        3.1.3 试验仪器
        3.1.4 试验试剂
    3.2 试验方法
        3.2.1 致病疫霉与HT-6 液体混合培养后抑菌效果分析
        3.2.2 致病疫霉与HT-6 对峙培养后抑菌物质的浸提及抑菌效果
        3.2.3 不同溶剂浸提液对孢子囊释放游动孢子和直接萌发的影响
        3.2.4 不同溶剂浸提液在马铃薯块茎上的防病作用
        3.2.5 不同溶剂浸提液在马铃薯叶片上的防病作用
    3.3 结果与分析
        3.3.1 液体混合培养后抑菌效果分析
        3.3.2 平板对峙培养后抑菌带中抑菌物质的浸提及抑菌作用
        3.3.3 不同溶剂浸提液对孢子囊释放游动孢子和直接萌发的影响
        3.3.4 不同溶剂浸提液在马铃薯块茎切片上的防病作用
        3.3.5 不同溶剂浸提液在叶片上的防病作用
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 HT-6抑菌物质的稳定性及对马铃薯抗性相关物质的影响
    4.1 试验材料
        4.1.1 供试菌株
        4.1.2 供试培养基
        4.1.3 试验仪器
        4.1.4 试验试剂
    4.2 试验方法
        4.2.1 致病疫霉与HT-6 对峙培养后抑菌物质甲醇浸提液的制备
        4.2.2 甲醇浸提液中抑菌物质含量的测定
        4.2.3 不同浓度甲醇浸提液影响致病疫霉菌丝体生长的观察
        4.2.4 甲醇浸提液影响马铃薯块茎切片中防御性酶活的测定
            4.2.4.1 酶液的提取
            4.2.4.2 过氧化物酶(POD)活性的测定
            4.2.4.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定
            4.2.4.4 多酚氧化酶(PPO)活性检测
        4.2.5 甲醇浸提液影响马铃薯块茎可溶性蛋白的测定
        4.2.6 甲醇浸提液中抑菌物质的稳定性
    4.3 结果与分析
        4.3.1 甲醇浸提液中抑菌物质的含量测定
        4.3.2 不同浓度甲醇浸提液对菌丝体生长的影响
        4.3.3 甲醇浸提液对马铃薯块茎防御性酶活的影响
        4.3.4 甲醇浸提液对马铃薯块茎可溶性蛋白的影响
        4.3.5 甲醇浸提液中抑菌物质的稳定性
    4.4 讨论
        4.4.1 防御酶系统可能的作用机制
        4.4.2 甲醇浸提液的稳定性
    4.5 小结
结论
参考文献
致谢
攻读学位期间取得的科研成果



本文编号:3737975

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