乌头内生菌的分离鉴定及其次生代谢产物研究

发布时间：2023-02-26 09:20

　　乌头为毛茛科,多年生草本植物,可入药,具杀虫杀菌活性,其所含乌头碱为主要活性成分,常采用植物提取法获得,但其来源有限,且产量有限。有研究表明,存在于健康植物组织内部的内生菌会产生与宿主植物相同或相似的化学成分。为探索乌头碱的微生物来源,本文以从乌头植株中分离纯化出的内生菌为研究对象,对其进行了较系统的研究,主要的研究内容如下:采用组织分离法分别从北乌头的健康根、茎、叶、种子以及川乌、草乌的种子中分离内生菌,试验共分离纯化出形态特征差异的内生真菌12株以及内生细菌11株,并根据其来源进行命名。通过HPLC分析,确定乌头碱出峰时间为20.022 min,SNCWT-003菌株、SNWT-010菌株、SNWT-011菌株、SNWT-013菌株和SNWT-014菌株在20.022 min附近有吸收峰,说明上述菌株的次生代谢产物中可能含有乌头碱。最后经HPLC-MS法分析,确定SNGWT-002菌株产乌头碱,菌丝体中含量为5.213×10^-2mg·mL^-1,SNCWT-003菌株产乌头碱,含量为5.64×10^-33 mg·mL

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文献综述
    1.1 乌头属植物杀虫抑菌活性研究现状
        1.1.1 乌头属植物杀虫活性研究进展
        1.1.2 乌头属植物抑菌活性研究进展
    1.2 乌头属植物内生菌的研究现状
    1.3 乌头碱的药用作用机理研究进展
        1.3.1 乌头碱的药理作用
        1.3.2 乌头碱的毒理作用
    1.4 乌头碱获取方法研究进展
        1.4.1 植物提取法
        1.4.2 化学合成法
        1.4.3 微生物发酵法
    1.5 论文立题依据和研究内容
第二章 乌头内生菌的分离与纯化
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
        2.2.1 乌头种子内生菌的分离与纯化
        2.2.2 乌头根部内生菌的分离与纯化
        2.2.3 乌头茎叶内生菌的分离与纯化
    2.3 结果与分析
        2.3.1 乌头内生真菌的分离与纯化
        2.3.2 乌头内生细菌的分离与纯化
    2.4 本章小结
第三章 内生菌中乌头碱的含量分析
    3.1 试验材料
    3.2 试验方法
        3.2.1 乌头内生菌次生代谢产物 HPLC 分析
        3.2.2 乌头内生菌次生代谢产物的 HPLC-MS 测定
    3.3 结果与分析
        3.3.1 乌头内生菌次生代谢产物HPLC分析
        3.3.2 乌头内生菌次生代谢产物HPLC-MS/MS分析
    3.4 本章小结
第四章 产乌头碱乌头内生真菌的鉴定
    4.1 试验材料
    4.2 试验方法
        4.2.1 产乌头碱内生真菌的形态学观察
        4.2.2 产乌头碱内生真菌分子生物学鉴定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 产乌头碱内生真菌的形态学观察
        4.3.2 产乌头碱内生真菌的分子生物学鉴定
    4.4 本章小结
第五章 乌头内生菌的抑菌活性研究
    5.1 试验材料
    5.2 试验方法
        5.2.1 乌头内生真菌对植物病原真菌抑菌活性的测定
        5.2.2 乌头内生细菌对植物病原真菌抑菌活性的测定
        5.2.3 数据处理
    5.3 结果与分析
        5.3.1 乌头内生真菌对植物病原真菌抑菌活性的测定
        5.3.2 乌头内生细菌对植物病原真菌抑菌活性的测定
    5.4 本章小结
第六章 结论与讨论
    6.1 结论
        6.1.1 乌头内生真菌次生代谢产物分析
        6.1.2 乌头内生菌抑菌活性研究
    6.2 讨论
        6.2.1 乌头内生菌生物活性研究现状
        6.2.2 植物内生菌可作为天然产物广阔的微生物来源
参考文献
附图
致谢



本文编号：3750264