喹乙醇化学发光免疫技术及时间分辨荧光免疫层析技术研究

发布时间：2024-01-29 20:37

　　喹乙醇(Olaquindox)又名喹酰胺醇,具有广谱抗菌作用,能提高饲料蛋白转化率等作用,常被用于饲料添加物,后经研究发现其具有蓄积毒性和致畸等危害,2018年我国农业部发布2638号公告,决定停止喹乙醇等三种兽药在动物食品中使用,因此开发快速、高效、准确的检测方法尤为重要。本文以喹乙醇抗原和单克隆抗体为基础,研究了化学发光体系规律,开发了基于鲁米洛化学发光酶联免疫技术及时间分辨免疫层析技术,并与常规免疫吸附试验和仪器分析方法进行对比和验证,主要研究内容如下:1.喹乙醇单克隆抗体扩大生产与鉴定采用快速融化法对实验室现有3株单克隆杂交瘤细胞复苏,采用体内诱生法大量制备腹水,辛酸-硫酸铵法纯化腹水,得到1#细胞株抗体效价最大为1:3200,并经鉴定单克隆抗体的类型及亚型为IgG1,其IC₅₀为22.013 ng/mL,与其他常用抗生素的交叉反应率均低于0.01%,本部分得到高灵敏性、高特异性的喹乙醇单克隆抗体,为后续免疫分析方法奠定了基础。2.化学发光免疫分析技术本部分建立了luminol-HRP-H₂O₂-Enhance化...

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【学位级别】：硕士

图2.1ELISA测定1#抗体灵敏度Fig.2.1Determinethesensitivityof1#antibodybyELISA

图3.1鲁米洛增敏发光系统

图3.2早期化学发光剂结构式

图3.3不同增强剂对发光体系的增强效果

本文编号：3888800