雌二醇/孕酮对奶牛乳腺上皮细胞NOD2受体表达及功能的影响

发布时间：2024-02-07 03:13

　　乳房炎是危害奶牛养殖业最为常见的疾病之一,在围产期发病率较高,该病的主要病因是细菌感染。核苷酸结合寡聚域(Nucleotide binding oligomerization domain,NOD)2是NOD样受体(NOD like receptors,NLR)家族中的重要一员,它参与机体免疫防御反应。雌二醇(17β-Estrodiol,E₂)和孕酮(Progesterone,P₄)是具有免疫调节功能的生殖激素,二者浓度在围产期的显著变化,与围产期感染性疾病高发有一定的相关性。因此,本试验以原代培养的奶牛乳腺上皮细胞(Bovine mammary epithelial cells,BMEC)为模型,探讨E₂和P₄对BMEC中NOD2受体表达及功能的影响。试验方法如下:(1)试验采用胶原酶Ⅰ消化法培养BMEC;采用不同浓度胰酶消化法,结合差速贴壁方法分离纯化BMEC;利用免疫荧光技术检测BMEC中角蛋白(Cytokeratin,CK)-18的表达情况,对BMEC进行鉴定;利用Western Blot方...

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【部分图文】：

图2.1奶牛乳腺上皮细胞的培养结果(100×)

.1.3.2奶牛乳腺上皮细胞的培养BMEC的培养结果如图2.1(A)所示，在培养的第3天即可观察到“鹅卵石”或“铺”样的BMEC(黑色箭头所示)，以及形状不规则或多角形的成纤维细胞(白色箭头所示BMEC成片区域性生长，而成纤维细胞分散于BMEC外围；如图2.....

图2.2奶牛乳腺上皮细胞的分离纯化结果(100×)

图2.2奶牛乳腺上皮细胞的分离纯化结果(100×)Fig.2.2Theresultsofseparationandpurificationforbovinemammaryepithelialcells(100×)：奶牛乳腺上皮细胞的第1次纯化；(....

图2.3奶牛乳腺上皮细胞的鉴定Fig.2.3Theidentificationresultsofbovinemammaryepithelialcells.(A)：光镜下的奶牛乳腺上皮细胞；(B)：奶牛乳腺上皮细胞DAPI核染色；(C)：奶牛乳腺上皮细胞CK-18阳性反应；(D)：(B)、(C)融合图

腺上皮细胞的第3次纯化。):Bovinemammaryepithelialcellswerepurifiedforthefirsttime;(B):Bovinemammpithelialcellswerepurifiedforthesec....

图2.4奶牛乳腺上皮细胞的生长曲线

llswerestainedbyDAPI;(C):CK-18pos;(D):Mergedfigure(B)andfigure(C).胞的生长曲线况绘制的生长曲线如图2.4所示，在传代后EC生长迅速，呈现对数生长；培养至6~7

本文编号：3896664