一株拮抗酿酒葡萄灰霉病的枯草芽孢杆菌T3筛

发布时间：2023-11-12 17:19

　　为筛选出对酿酒葡萄灰霉病具有良好抑制作用的拮抗菌,从酿酒葡萄根际土壤进行微生物分离,以灰葡萄孢(Botrytis cinerea)为靶标菌株,采用牛津杯法对拮抗菌进行筛选,通过形态学、生理生化特征以及16S rDNA进行鉴定分析,对拮抗菌进行生长特性及抑菌分析。结果表明:筛选出一株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)具有显著抑制作用的T3菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),培养24～48 h T3菌株进入稳定期,最适的生长温度为37℃,最适pH为7.0。T3菌株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)MIC为3.6×10⁵ CFU/mL,MBC为3.6×10⁶ CFU/mL,3.6×10⁹ CFU/mL T3菌株对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)抑菌直径为31.6±0.2 mm(P<0.05),抑菌效价为158.0±1.0 mm/mL(P<0.05)。扫描电镜观察T3菌株造成灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌丝畸形、扭曲、顶端膨大、原生质收...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 拮抗菌的筛选
            1.2.1.1 B. cinerea培养及孢子悬浮液制备
            1.2.1.2 拮抗菌的分离纯化
            1.2.1.3 拮抗菌发酵液制备
            1.2.1.4 拮抗菌的筛选
        1.2.2 拮抗菌株的鉴定
            1.2.2.1 拮抗菌株形态观察
            1.2.2.2 菌株生理生化鉴定
            1.2.2.3 16S rDNA分子生物学鉴定
        1.2.3 拮抗菌生长特性分析
            1.2.3.1 拮抗菌生长曲线绘制
            1.2.3.2 拮抗菌最适培养温度测定
            1.2.3.3 拮抗菌最适pH测定
        1.2.4 B. cinerea拮抗菌抑菌作用初探
            1.2.4.1 拮抗菌对B.cinerea抑菌作用随时间变化趋势
            1.2.4.2 拮抗菌对B.cinerea MIC和MBC的测定
            1.2.4.3 不同浓度的拮抗菌株对B.cinerea抑制作用
            1.2.4.4 扫描电镜观察拮抗菌株对B.cinerea菌丝生长的影响
    1.3 数据处理
2 结果与分析
    2.1 拮抗菌的筛选结果
    2.2 拮抗菌的鉴定结果
        2.2.1 拮抗菌形态学鉴定结果
        2.2.2 拮抗菌生理生化鉴定结果
        2.2.3 拮抗菌16S rDNA序列分析
    2.3 拮抗菌生长特性结果
        2.3.1 拮抗菌生长曲线结果
        2.3.2 拮抗菌的最适生长温度
        2.3.3 拮抗菌的最适pH
    2.4 拮抗菌对B. cinerea抑菌作用分析
        2.4.1 拮抗菌对B.cinerea抑菌作用随时间变化趋势
        2.4.2 拮抗菌对B.cinerea的MIC和MBC
        2.4.3 不同浓度的拮抗菌对B.cinerea抑制作用结果
        2.4.4 扫描电镜观察T3菌株对B.cinerea菌丝生长的影响
3 结论与讨论



本文编号：3863597