一株晋大53号大豆中慢生根瘤菌的分离鉴定及抗逆分析

发布时间：2024-04-16 00:18

　　为筛选适于在山西省主栽品种晋大53号推广应用的根瘤菌资源,以晋大53号大豆根瘤为研究对象,采用组织块分离法、平板划线法、震荡培养法以及分子生物学方法,对根瘤菌进行分离、纯化和鉴定,并研究其产酸、碱能力、耐盐特性以及结瘤能力。结果表明:从晋大53号大豆根瘤中成功分离并纯化出1株根瘤菌,编号为53-4,具有刚果红染料抗性,产酸快,可耐5%浓度NaCl。测序获得该菌株的16S rDNA序列,经NCBI在线数据库比对后,发现53-4菌株同Rhizobia sp.(HQ589024.1)、Beijerinckia fluminensis(NR 116306.1)和Mesorhizobium sp.(JN622153.1)等具有高达99%的序列同源性。NJ系统发育树显示该菌株同Mesorhizobium sp.(JN622153.1)聚为同一支,表明53-4菌株属于中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)。对该菌株结瘤基因nodA进行PCR扩增,经电泳检测能够扩增出明显条带,说明该菌株基因组中具有根瘤菌关键结瘤基因nodA。回接53-4的晋大53号的株高、地上部鲜重、根鲜重、植株干重和根...

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【部分图文】：

图1根瘤菌53-4表型及刚果红抗性

晋大53号大豆根瘤各破损组织块附近均有菌落生长,且各细菌菌落形态及颜色一致。从较大的单菌落中挑选到1株不被刚果红染色的细菌,编号为53-4。菌落表面湿润、不透明、乳白色、微微凸起(图1),这些生长特点均与根瘤菌的基本特征[25]相符,初步判断该菌株为根瘤菌。2.2根瘤菌16S....

图2根瘤菌53-4菌株16SrDNA序列NJ系统发育树

对53-4菌株的16SrDNA扩增序列NCBI在线数据库比对结果显示,菌株53-4同Rhizobiasp.(HQ589024.1)、Beijerinckiafluminensis(NR116306.1)和Mesorhizobiumsp.(JN622153.1)等具有较高....

图3根瘤菌53-4结瘤基因nodA电泳检测结果

回接结果显示,接种USDA110的晋大53号大豆的地上部分鲜重、植株干重、根瘤数和根瘤鲜重显著高于不接菌对照;回接根瘤菌53-4的晋大53号大豆的株高、地上部分鲜重、根鲜重、植株干重和根瘤鲜重均高于不接菌处理和接种USDA110处理,其中地上部分鲜重和根瘤鲜重显著高于接种根瘤菌U....

图4根瘤菌53-4回接结果

表1根瘤菌回接后大豆生长情况Table1Soybeangrowthafterre-inoculationofrhizobia处理Treatment株高Plantheight/cm地上部分鲜重Shootfreshweight/g根鲜重Rootfres....

本文编号：3956164