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苹果阳离子氨基酸转运蛋白(CAT)的鉴定、比较与表达分析

发布时间:2021-09-24 20:07
  阳离子氨基酸转运蛋白(CAT)在植物氨基酸转运与氮素代谢中具有重要作用,重要经济作物苹果中尚未见此类蛋白的相关报道。本文利用生物信息学和分子生物学的方法,对苹果CAT (命名为MdCAT)成员进行鉴定、比较与表达分析。根据拟南芥CAT蛋白序列,在苹果基因组中共鉴定出15个MdCAT成员,它们不均衡地位于8条染色体上。大多数MdCAT具有10个及以上的跨膜区,并具有相似的二级结构组成和三维空间构象。遗传进化树分析表明, MdCAT蛋白分为4组(I、II、III和IV),并且4组成员在保守基序分布上,表现出各自的独特性。电子表达谱分析显示, MdCAT广泛表达于各组织中,尤其在花和果实等表达较高,不同成员稍有差异。在果实发育中, MdCAT3/7/6/14等转录丰度有明显的增加,在果实的氨基酸转运中可能扮演关键角色;休眠芽的表达数据提示,部分MdCAT参与到苹果芽的休眠过程。除此之外,利用实时荧光定量PCR试验,检测了氮素匮乏状态下MdCAT的相对表达,结果表明MdCAT1/6/10/13响应氮饥饿,可能在氮素代谢中发挥重要作用。 

【文章来源】:植物生理学报. 2020,56(12)北大核心CSCD

【文章页数】:16 页

【部分图文】:

苹果阳离子氨基酸转运蛋白(CAT)的鉴定、比较与表达分析


Md CAT蛋白的跨膜区

蛋白,位点,苏氨酸,丝氨酸


Md CAT蛋白的预测活性位点

蛋白,苏氨酸,丝氨酸,酪氨酸


图2 Md CAT蛋白的预测活性位点除此之外,通过对15个Md CAT蛋白中4种二级结构元件(α-螺旋、β-转角、无规卷曲和延伸链)进行比较发现(表3),α-螺旋和无规卷曲2种结构占比较大,尤其是α-螺旋;而β-转角所占的比例都是最低的。为了观察此类蛋白三维空间构象,利用Phyre2进行了同源模型分析,三级结构同样显示了Md CAT蛋白中具有高比例的α-螺旋。在图4中可以看到,15个Md CAT的模型结构是高度一致的,暗示它们功能的相似性。同时,在对拟南芥和苹果CAT蛋白结构三维建模比较时(拟南芥数据未列出),注意到它们均选择了c5oqt A_作为最佳模板。该模板注释为细菌阳离子氨基酸转运体(cat)2同系物,因此间接反映了筛选的苹果CAT蛋白的准确性。

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
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[3]氨基酸转运蛋白与铁皮石斛原球茎发生[D]. 刘楚琪.西南交通大学 2019
[4]番茄SlCAT2基因的克隆及功能研究[D]. 杨丽婷.重庆大学 2014



本文编号:3408370

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