番木瓜干旱胁迫相关CpDHN基因的克隆与原核表达

发布时间：2024-05-14 01:03

　　本研究基于转录组获得的CpDHN转录本序列,以番木瓜‘台农二号’组培苗叶片为材料,采用RT-PCR技术克隆了该基因包含完整ORF在内的425 bp cDNA序列。序列分析表明,CpDHN预测编码93个氨基酸,其理论分子量为10.50 kDa、等电点为6.62、总平均疏水指数为-1.984、核定位。除保守的K片段外,蛋白还含有1个S片段,可归为KS型脱水素。在拟南芥中的10个脱水素中,CpDHN与AtLEA8的亲缘关系最近,相似性为53.3%。值得注意的是,虽然CpDHN的编码区不存在内含子,但其3’UTR含有1个与AtLEA8类似的内含子。表达谱分析显示,该基因在根和叶片中均受干旱胁迫诱导。此外,还构建了CpDHN的原核表达载体,SDS-PAGE分析显示,该蛋白在大肠杆菌中可高效表达。这些结果为下一步的功能鉴定奠定了坚实的基础。

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【部分图文】：

图6CpDHN基因不同组织干旱胁迫下表达特性Fig.6ExpressionprofilesofCpDHNgeneindifferenttissuesunderdroughtstress

2410热带作物学报第41卷K片段用阴影标识，S片段用方框标识，Y片段用下划线标识。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.图4CpD....

图7CpDHN在大肠杆菌中表达后SDS-PAGE分析Fig.7SDS-PAGEanalysisofCpDHN-overexpressedE.coli

第12期郭静远等:番木瓜干旱胁迫相关CpDHN基因的克隆与原核表达2411图7CpDHN在大肠杆菌中表达后SDS-PAGE分析Fig.7SDS-PAGEanalysisofCpDHN-overexpressedE.coli3讨论植物的自然生长环境是由一系列复杂的非生物胁迫和生物胁....

图4CpDHN与10个拟南芥脱水素的多序列比对Fig.4MultiplesequencealignmentofCpDHNandtenAtDHNsK片段用阴影标识，S片段用方框标识

2410热带作物学报第41卷K片段用阴影标识，S片段用方框标识，Y片段用下划线标识。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.图4CpD....

图5CpDHN与10个拟南芥脱水素的进化分析Fig.5PhylogeneticanalysisofCpDHNandtenAtDHNs

2410热带作物学报第41卷K片段用阴影标识，S片段用方框标识，Y片段用下划线标识。TheKsegmentismarkedwithshadow,whereastheSsegmentandYsegmentareboxedorunderlined,respectively.图4CpD....

本文编号：3972966