C5a/C5aR信号在红内期全虫疫苗诱导免疫性保护中的作用和机制研究

发布时间：2021-03-21 16:56

　　疟疾是一类严重危害人类健康的热带传染性疾病，在全球有着很高的发病率和致死率，而红内期疫苗是疟疾防治中最经济有效的方式之一。虽然全世界科学家付出了极大的努力，但到目前为止，仍然没有一种有效的红内期亚单位疫苗问世。目前红内期亚单位疫苗存在的主要问题在于疟原虫抗原的高变异性及裂殖子表面蛋白的多态性。最近，红内期全虫疫苗被证实它能够保护宿主抵抗多种疟原虫攻击，而且其保护作用主要由CD4+T细胞所介导，这也许能为红内期亚单位疫苗的设计提供一种新的策略。然而，红内期全虫疫苗中疟原虫特异性CD4+T细胞活化的具体机制仍然很不清楚。补体作为天然免疫系统十分重要的组成部分，最近的研究表明，补体在适应性免疫的调节中同样发挥着不可替代的作用。比如，补体C5a通过调节DC功能间接影响CD8+T细胞活化。然而，C5a在全虫疫苗诱导CD4+T细胞反应中的作用还不清楚。在本研究中，我们首先观察红内期全虫疫苗免疫后，WT和C5aR-/-小鼠体内补体活化及C5a产生情况，并确认C5a/C5aR信号是否在红内期全虫疫苗中发挥作用。然后我们检测两种小鼠免疫后体内抗体及CD4+T细胞功能是否发生改变，并采用过继转移实验证实是... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ELISA检测免疫小鼠血清中的C5a浓度Fig1-1：C5alevelinserumofbothimmunizedWTandC5sR-/-mice

图 1-2：pRBC 攻击后小鼠原虫血症及存活率的变化Fig1-2：Parasitemia and survival rate in mice after pRBC challenging讨 论为，红内期亚单位疫苗失败的主要原因在于其针对的疟原虫表面态性[25]。最近，Good 等研究证实，低剂量反复冻融的 pRBC 与免疫，能够诱导小鼠产生强有力的保护性免疫应答。我们的研究 裂解产物免疫小鼠，能够为小鼠提供保护性免疫。灭活红内期全疫依赖于 CD4+T 细胞反应，其通过分泌 IFN-γ 和 NO 发挥保护生抗体的现有红内期疟疾亚单位疫苗不同的是，灭活红内期全虫胞的靶抗原表位肽非常保守，能够对多种疟原虫提供交叉免疫保略也许能为亚单位疫苗的设计提供新的思路。为天然免疫十分重要的组成部分，能够在机体感染病毒或细菌的

第三军医大学硕士学位论文结 果免疫小鼠血清疟原虫特异性抗体滴度及功能检测主保护性免疫中，疟原虫特异性抗体扮演着十分重要的角色[31-32]，全虫疫苗模型中 IgG 的作用，我们收集免疫小鼠血清，采用 ELIS异性抗体 IgG 及其亚类 IgG1、IgG2a 的滴度。结果如图所示(图体总 IgG 及亚类 IgG2a 滴度相同。虽然 C5aR-/-免疫小鼠血清 I鼠低一个数量级，但没有统计学差异(P>0.05)。为了进一步确定内期全虫疫苗中的作用，我们将两种小鼠的免疫血清过继转移至17XL 进行攻击。与过继转移 Na ve 小鼠血清相比，过继转移免疫鼠的血清虽能轻度降低 Na ve 小鼠的原虫血症，但并不能提供保护，所有小鼠的原虫血症可高达 60%左右，并于第 10 天全部死亡


本文编号：3093220