弓形虫R0P16 Ⅰ/Ⅲ DNA疫苗不能诱导BALB/c小鼠有效的保护性免疫

发布时间：2021-04-28 13:47

　　目的：利用ROP16Ⅰ/Ⅲ基因真核表达重组质粒免疫BALB/c雌性小鼠,检测小鼠体液免疫和细胞免疫,评估ROP16Ⅰ/Ⅲ,作为潜在的分子疫苗的价值。方法：克隆Chinese 1型弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ,将其插入真核表达载体pEGFP-C2中构建重组质粒pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ,脂质体法转染T293细胞并观察体外表达。Western blotting分析鉴定。将36只SPF级小鼠随机均分为：①PBS组；②空质粒组；和③EGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ组。每2W肌注免疫1次（100 μ g/只）,共3次；于免疫前及每次肌注前1d和末次免疫后2W收集小鼠血清,间接ELISA法检测血清抗弓形虫IgG。于末次免疫2w后取小鼠脾脏,分离淋巴细胞培养测细胞因子。剩余小鼠腹腔注射Chinese 1型弓形虫Wh3株速殖子1000个/每只,观察小鼠攻击感染后的存活时间和存活率。结果：真核表达载体构建成功,体外见到重组质粒pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ在T293细胞的表达；pEGFP-ROP16Ⅰ/Ⅲ末次免疫后血清中IgG水平及脾淋巴细胞细胞因子均无明显升高（P>0.05）；攻击感染后,免疫组小鼠比对照组... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

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前言
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材料与方法
结果
讨论
结论
参考文献
附录
    附录一
    附录二
    附录三 致谢
综述
    参考文献



本文编号：3165586