基于DNA疫苗技术的病毒保护性抗体研究

发布时间：2021-11-24 10:17

　　第一部分H7亚型禽流感DNA疫苗的免疫原优化研究目的：通过优化DNA疫苗的免疫原设计提高H7禽流感疫苗的免疫原性。方法：以2003年H7亚型禽流感病毒荷兰株A/Netherlands/219/2003（H7N7）血凝素（HA）为免疫原,设计三种表达血凝素的DNA疫苗。第一种以自身引导序列表达全长HA；第二种以人纤溶酶原激活物（tPA）替换自身的引导序列表达全长HA；第三种去除HA的跨膜区和胞内区,以tPA为引导序列表达截短的HA。以新西兰兔为动物模型进行免疫。ELISA检测免疫兔血清中HA特异性结合抗体的水平,血凝抑制实验和假病毒中和实验检测免疫兔血清中针对同源性和异源性H7禽流感病毒的保护性抗体水平,收集3例2013年H7N9禽流感患者血清,分析其对本实验疫苗株H7禽流感病毒的交叉中和能力。结果：三种表达血凝素的DNA疫苗均诱导实验兔产生高水平的结合抗体,无论是针对同源性还是异源性的H7禽流感病毒,均以tPA为引导序列表达全长HA的DNA疫苗诱导的功能性抗体的水平最高,以自身引导序列表达全长HA的DNA疫苗次之,表达截短HA的DNA疫苗诱导功能性抗体的能力最差。2013年H7N9禽流... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：174 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

7HANL219DNA疫苗的构建

DNA疫苗酶切鉴定图

19.dTM (未 11切}4. H7 HA HL219.wt (BamH l+Pst 1)5. H7 HA HL219.wt (BamH l+Nhe I)6. H7 HA HL219.wt (BamH 丨+Hhe I)图2.DNA疫苗酶切鉴定图3. ELISA法检测免疫兔血清HA特异性抗体应用ELISA检测动物免疫血清中HA特异性抗体，结果表明在DNA疫苗2次免疫后2周（第4周）可以检测到HA特异性抗体，第3次免疫后2周（第6周）抗体水平进一步升高（图3A)。检测第4次免疫后两周HA特异性抗体的滴度，三种DNA疫苗免疫组均产生高水平的HA抗体（104-105)(图3B)。空载体免疫组血清未检测到HA特异性抗体。45

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3515778