小鼠重组鞘磷脂脂蛋白免疫原性多肽片段的原核表达与纯化

发布时间：2021-12-12 09:41

　　目的建立并优化重组小鼠鞘磷脂脂蛋白（PLP）免疫原性多肽片段（PLP139-208）的原核表达方法。方法构建重组质粒PLP-pET-32a（+）,利用基因工程技术将质粒转化到BL21（DE3）中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导后,进行PLP139-208的原核表达。为提高多肽片段的获得量,从诱导时间、诱导温度2个方面进行原核表达条件优化。诱导表达的蛋白多肽经Ni-NTA树脂纯化后,用Western blot法进行蛋白鉴定。结果表达条件优化、并经Western blot法蛋白鉴定后,确定诱导温度23℃、诱导时间20 h、 0.5 mmol/L IPTG作为PLP多肽的最适原核表达条件。结论建立小鼠重组PLP139-208蛋白原核表达方法,为改良EAE动物模型的制备方法及研究PLP诱导自身免疫性脱髓鞘病变的机制奠定了实验基础。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2019,35(10)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

测序序列与小鼠PLP编码序列比对图

诱导表达后重组PLP的SDS-PAGE染色图

重组PLP纯化结果


本文编号：3536441