NK细胞抑制性受体TIGIT的功能研究
发布时间：2023-01-12 17:44
NK细胞是重要的天然免疫细胞,在抗肿瘤、抗感染的免疫应答中发挥重要的作用。虽然NK细胞行使重要的免疫监视功能,但在一些情形下NK细胞的过度活化会导致不必要的组织损伤、甚至危及生命,因而,机体需要通过某种方式维持NK细胞的活性,使之处于可控的范围内,从而维持NK细胞对自身的耐受。与T、B细胞的免疫耐受相比较,维持NK细胞对自身耐受的研究较少,目前认为可以通过抑制性受体介导的方式或活化后诱导的细胞凋亡来实现,而抑制性受体在NK细胞与辅助细胞之间相互作用的过程中发挥重要的调控功能。在富含NK细胞的肝脏中,NK细胞与辅助细胞之间的相互作用是NK细胞介导的天然免疫应答的重要环节,通过研究抑制性受体在NK细胞介导的肝脏天然免疫应答中的调控作用及对后者造成的病理变化的影响,将有助于了解NK细胞维持自身耐受的机制。 主要获得的结果有以下两部分： 1.抑制性受体TIGIT通过负调NK细胞和枯否细胞相互作用在急性病毒性肝炎中对小鼠起保护作用 我们发现病毒双链RNA类似物poly I:C联合肝脏致敏齐D-GalN的注射、或嗜肝病毒腺病毒的急性感染,会导致TIGIT选择性地在NK细胞上...
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
表序
图序
符号说明
第一章 综述：NK细胞在肝脏天然免疫应答过程中维持自身耐受的机制
1.1 NK细胞是重要的天然免疫细胞
1.2 NK细胞与自身免疫性疾病
1.3 NK细胞维持自身耐受的机制
1.3.1 免疫耐受及其意义
1.3.2 诱导免疫耐受的方式
1.3.3 决定免疫耐受的影响因素
1.3.4 形成免疫耐受的机制
1.3.5 NK细胞对自身的耐受
1.4 NK细胞与辅助细胞的相互作用
1.4.0 T细胞与辅助细胞的相互作用
1.4.1 NK细胞与辅助细胞的相互作用
1.5 共抑制分子TIGIT的结构与功能
1.5.1 TIGIT的结构
1.5.2 TIGIT在T细胞上的功能
1.5.3 TIGIT在NK细胞上的功能
1.6 肝脏是天然免疫优势器官
第二章 引言
2.1 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的表达变化
2.2 TIGIT在肝脏再生过程中的表达变化
2.3 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的作用
2.4 TIGIT在肝脏再生过程中的作用
2.5 PVR在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的作用
2.6 PVR在肝脏再生中的作用
2.7 TIGIT与配体相互作用在NK细胞与巨噬细胞共培养中的作用
2.8 TIGIT与IFN-Γ之间的关系
第三章 实验材料与方法
3.1 实验材料
3.1.1 实验材料
3.1.2 试剂配制
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 poly Ⅰ：C/D-GalN诱导肝损伤模型
3.2.2 腺病毒急性感染模型
3.2.3 70%肝切除
3.2.4 细胞的分离与纯化
3.2.5 组织病理分析
3.2.6 免疫组织化学染色
3.2.7 单克隆抗体纯化
3.2.8 细胞清除
3.2.9 血清转氨酶水平的检测
3.2.10 细胞过继转输
3.2.11 PVR基因的敲低
3.2.12 杀伤实验
3.2.13 细胞共培养实验
3.2.14 IFN-γ的ELISA检测
3.2.15 抗小鼠TIGIT阻断抗体的制备
3.2.16 NK细胞-枯否细胞结合实验
3.2.17 枯否细胞迁移实验
3.2.18 过表达载体的构建
3.2.19 干扰载体的构建
3.2.20 复制缺陷型腺病毒的制备
3.2.21 细胞计数
3.2.22 流式细胞术细胞表面分子标记
3.2.23 流式细胞术胞内因子标记
3.2.24 统计学分析
第四章 实验结果
4.1 TIGIT通过负调NK细胞和枯否细胞相互作用在急性病毒性肝炎中对小鼠起保护作用
4.1.1 TIGIT不影响NK细胞成熟标志的表达
4.1.2 poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导小鼠肝脏NK细胞上调表达TIGIT
4.1.3 TIGIT对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝脏损伤具有保护作用
4.1.4 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠急性肝炎中抑制NK细胞的活化
4.1.5 NK细胞表达的TIGIT对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤具有保护作用
4.1.6 TIGIT可能不影响TIGIT非依赖的NK细胞功能
4.1.7 在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝炎中,TIGIT在NK细胞与肝细胞的识别中的作用不明显
4.1.8 枯否细胞表达的PVR分子对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤具有保护作用
4.1.9 枯否细胞表达的PVR分子对枯否细胞本身产生细胞因子、迁移以及和NK细胞相互结合没有明显的影响
4.1.10 TIGIT-PVR负调控NK细胞与枯否细胞的相互作用
4.1.11 TIGIT-CD112对NK细胞与枯否细胞相互作用的调控效应不明显
4.1.12 TIGIT在腺病毒急性感染诱导的肝损伤中对小鼠起保护作用
4.1.13 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤中的保护作用依赖IFN-γ的存在
4.2 TIGIT通过负调NK细胞与肝细胞相互作用对肝脏再生进行保护
4.2.1 肝脏再生过程中NK细胞上调表达TIGIT
4.2.2 TIGIT对肝脏再生具有保护作用
4.2.3 TIGIT在肝脏再生过程中抑制NK细胞活化
4.2.4 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖NK细胞的存在
4.2.5 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖于肝脏再生过程中肝细胞上调表达的PVR
4.2.6 TIGIT负调NK细胞与肝细胞相互作用时产生的IFN-γ
4.2.7 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖于IFN-γ的存在
第五章 讨论
5.1 活化性受体CD226和CD96与抑制性受体TIGIT之间的竞争关系
5.2 TIGIT配体PVR的抑制性功能
5.3 TIGIT的调控效应在NK细胞面对不同靶细胞时的差异性
5.4 NK细胞对肝细胞增大的调控
5.5 TIGIT-PVR相互作用的潜在临床意义
参考文献
致谢
攻读博士学位期间的主要研究成果
论文发表情况及专利成果
会议论文
本文编号：3730224
【文章页数】：99 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
表序
图序
符号说明
第一章 综述：NK细胞在肝脏天然免疫应答过程中维持自身耐受的机制
1.1 NK细胞是重要的天然免疫细胞
1.2 NK细胞与自身免疫性疾病
1.3 NK细胞维持自身耐受的机制
1.3.1 免疫耐受及其意义
1.3.2 诱导免疫耐受的方式
1.3.3 决定免疫耐受的影响因素
1.3.4 形成免疫耐受的机制
1.3.5 NK细胞对自身的耐受
1.4 NK细胞与辅助细胞的相互作用
1.4.0 T细胞与辅助细胞的相互作用
1.4.1 NK细胞与辅助细胞的相互作用
1.5 共抑制分子TIGIT的结构与功能
1.5.1 TIGIT的结构
1.5.2 TIGIT在T细胞上的功能
1.5.3 TIGIT在NK细胞上的功能
1.6 肝脏是天然免疫优势器官
第二章 引言
2.1 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的表达变化
2.2 TIGIT在肝脏再生过程中的表达变化
2.3 TIGIT在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的作用
2.4 TIGIT在肝脏再生过程中的作用
2.5 PVR在POLY Ⅰ：C/D-GALN诱导肝损伤及在腺病毒急性感染过程中的作用
2.6 PVR在肝脏再生中的作用
2.7 TIGIT与配体相互作用在NK细胞与巨噬细胞共培养中的作用
2.8 TIGIT与IFN-Γ之间的关系
第三章 实验材料与方法
3.1 实验材料
3.1.1 实验材料
3.1.2 试剂配制
3.1.3 实验仪器
3.2 实验方法
3.2.1 poly Ⅰ：C/D-GalN诱导肝损伤模型
3.2.2 腺病毒急性感染模型
3.2.3 70%肝切除
3.2.4 细胞的分离与纯化
3.2.5 组织病理分析
3.2.6 免疫组织化学染色
3.2.7 单克隆抗体纯化
3.2.8 细胞清除
3.2.9 血清转氨酶水平的检测
3.2.10 细胞过继转输
3.2.11 PVR基因的敲低
3.2.12 杀伤实验
3.2.13 细胞共培养实验
3.2.14 IFN-γ的ELISA检测
3.2.15 抗小鼠TIGIT阻断抗体的制备
3.2.16 NK细胞-枯否细胞结合实验
3.2.17 枯否细胞迁移实验
3.2.18 过表达载体的构建
3.2.19 干扰载体的构建
3.2.20 复制缺陷型腺病毒的制备
3.2.21 细胞计数
3.2.22 流式细胞术细胞表面分子标记
3.2.23 流式细胞术胞内因子标记
3.2.24 统计学分析
第四章 实验结果
4.1 TIGIT通过负调NK细胞和枯否细胞相互作用在急性病毒性肝炎中对小鼠起保护作用
4.1.1 TIGIT不影响NK细胞成熟标志的表达
4.1.2 poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导小鼠肝脏NK细胞上调表达TIGIT
4.1.3 TIGIT对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝脏损伤具有保护作用
4.1.4 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠急性肝炎中抑制NK细胞的活化
4.1.5 NK细胞表达的TIGIT对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤具有保护作用
4.1.6 TIGIT可能不影响TIGIT非依赖的NK细胞功能
4.1.7 在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝炎中,TIGIT在NK细胞与肝细胞的识别中的作用不明显
4.1.8 枯否细胞表达的PVR分子对poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤具有保护作用
4.1.9 枯否细胞表达的PVR分子对枯否细胞本身产生细胞因子、迁移以及和NK细胞相互结合没有明显的影响
4.1.10 TIGIT-PVR负调控NK细胞与枯否细胞的相互作用
4.1.11 TIGIT-CD112对NK细胞与枯否细胞相互作用的调控效应不明显
4.1.12 TIGIT在腺病毒急性感染诱导的肝损伤中对小鼠起保护作用
4.1.13 TIGIT在poly Ⅰ：C/D-GalN联合诱导的小鼠肝损伤中的保护作用依赖IFN-γ的存在
4.2 TIGIT通过负调NK细胞与肝细胞相互作用对肝脏再生进行保护
4.2.1 肝脏再生过程中NK细胞上调表达TIGIT
4.2.2 TIGIT对肝脏再生具有保护作用
4.2.3 TIGIT在肝脏再生过程中抑制NK细胞活化
4.2.4 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖NK细胞的存在
4.2.5 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖于肝脏再生过程中肝细胞上调表达的PVR
4.2.6 TIGIT负调NK细胞与肝细胞相互作用时产生的IFN-γ
4.2.7 TIGIT对肝脏再生的保护作用依赖于IFN-γ的存在
第五章 讨论
5.1 活化性受体CD226和CD96与抑制性受体TIGIT之间的竞争关系
5.2 TIGIT配体PVR的抑制性功能
5.3 TIGIT的调控效应在NK细胞面对不同靶细胞时的差异性
5.4 NK细胞对肝细胞增大的调控
5.5 TIGIT-PVR相互作用的潜在临床意义
参考文献
致谢
攻读博士学位期间的主要研究成果
论文发表情况及专利成果
会议论文
本文编号：3730224
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/3730224.html
最近更新
教材专著