DNase抑制肺炎链球菌青霉素耐药基因转移的研究

发布时间：2023-08-18 17:58

　　当前,细菌耐药已经成为严重的公共卫生危机,严重威胁着人类的身体健康和生命安全,大有逐渐加重之势,是人类面临的亟待破解的难题。破解细菌耐药尽管需要加大研发杀伤耐药菌的新药、合理使用抗菌药物、适度补充益生菌等,但是这些措施似乎仍不能实现破解细菌耐药的难题。导致这一局面的重要原因是这些基本防治对策不能抑制由细菌转化、转导和接合引起的细菌耐药基因的水平传播,以及由此引起的耐药细菌的快速蔓延。基于上述细菌耐药的严重形势以及现有防治对策的分析,本研究试图以肺炎链球菌转化为模型,以肺炎链球菌标准菌株为受体菌,以青霉素耐药肺炎链球菌为供体菌,探究DNase干预肺炎链球菌青霉素耐药基因转移的作用,以便为深入研究切断细菌耐药基因水平传播提供新的思路和方法。本研究方法分为四个基本阶段。在第一实验阶段,主要对后续转化和抑制转化实验中的受体菌及供体菌进行基本生物学性状检测,以便为后续实验提供可靠的基本要素和有关数据。这些基本生物学性状检测主要包括受体菌及供体菌的optochin试验、青霉素结合蛋白基因鉴定以及生长曲线测定;在第二实验阶段,为了给后续转化和抑制转化实验提供含青霉素耐药基因的外源性DNA和有关数据,...

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
    1 细菌耐药机制的研究
        1.1 耐药基因水平转移研究
        1.2 细菌自然转化的研究进展
            1.2.1 细菌转化现象的研究
            1.2.2 肺炎链球菌转化现象的研究
    2 肺炎链球菌对青霉素类耐药的研究
        2.1 肺炎链球菌的概述及其危害
        2.2 青霉素简介
        2.3 青霉素耐药肺炎链球菌现状
    3 DNase作用机理与临床应用的研究
        3.1 DNase作用机理
        3.2 DNase在临床中的应用
    4 本研究的目的与意义
第一章 肺炎链球菌鉴定与生长曲线测定
    1 试验材料
        1.1 试验菌株
        1.2 试验仪器
        1.3 试验药品与试剂
    2 试验方法
        2.1 肺炎链球菌的活化与纯化
        2.2 肺炎链球菌形态学鉴定与生化鉴定
            2.2.1 肺炎链球菌形态学鉴定
            2.2.2 生化鉴定
            2.2.3 optochin试验
        2.3 青霉素结合蛋白基因检测
        2.4 肺炎链球菌生长曲线测定
    3 试验结果
        3.1 肺炎链球菌鉴定结果
            3.1.1 肺炎链球菌形态学鉴定结果
            3.1.2 肺炎链球菌生化鉴定结果
            3.1.3 optochin试验结果
        3.2 青霉素结合蛋白基因检测结果
        3.3 肺炎链球菌生长曲线测定结果
    4 讨论
第二章 提取青霉素耐药肺炎链球菌DNA并进行相关鉴定
    1 试验材料
        1.1 试验菌株
        1.2 试验仪器
        1.3 试验药品与试剂
    2 试验方法
        2.1 青霉素耐药肺炎链球菌和肺炎链球菌标准菌株的活化
        2.2 青霉素耐药肺炎链球菌DNA的提取
        2.3 肺炎链球菌标准菌株和青霉素耐药肺炎链球菌DNA的测序和分析
    3 试验结果
        3.1 提取青霉素耐药肺炎链球菌DNA以及相关鉴定的结果
        3.2 肺炎链球菌标准菌株和青霉素耐药肺炎链球菌DNA的测序和分析的结果
    4 讨论
第三章 用外源性青霉素耐药肺炎链球菌DNA转化肺炎链球菌标准菌株并进行相关鉴定
    1 试验材料
        1.1 试验菌株
        1.2 试验仪器
        1.3 试验药品与试剂
    2 试验方法
        2.1 肺炎链球菌标准菌株的活化
        2.2 用外源性青霉素耐药肺炎链球菌DNA转化肺炎链球菌标准菌株
        2.3 转化后细菌悬液的optochin和苯唑西林药敏试验
        2.4 转化后实验组和对照组肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因的测序与分析
    3 试验结果
        3.1 肺炎链球菌标准菌株optochin和苯唑西林药敏试验结果
        3.2 转化后细菌悬液的optochin和苯唑西林药敏试验结果
        3.3 转化后实验组和对照组肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因的测序与分析结果
    4 讨论
第四章 DNase抑制青霉素耐药肺炎链球菌DNA转化肺炎链球菌标准菌株并进行相关鉴定
    1 试验材料
        1.1 试验菌株
        1.2 试验仪器
        1.3 试验药品与试剂
    2 试验方法
        2.1 肺炎链球菌标准菌株的活化
        2.2 DNase抑制青霉素耐药肺炎链球菌DNA转化肺炎链球菌标准菌株
        2.3 DNase抑制转化后细菌悬液的optochin和苯唑西林药敏试验
        2.4 DNase抑制转化后实验组和对照组肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因的测序与分析
    3 试验结果
        3.1 DNase抑制转化后细菌悬液的optochin和苯唑西林药敏试验结果
        3.2 DNase抑制转化后实验组和对照组肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因的测序与分析结果
    4 讨论
实验结论
致谢
参考文献
缩略词表
附录



本文编号：3842673