缺血再灌注对小鼠胸部皮瓣的影响及机制研究

发布时间：2023-10-12 01:35

　　目的建立一种更稳定、可重复的小鼠皮瓣缺血再灌注损伤(IRI)模型,明确皮瓣缺血再灌注损伤机制,阐述皮瓣缺血时间、再灌注血流量与皮瓣损伤程度的关系。方法共选用162只SPF级ICR健康雄性小鼠为本次实验对象。(1)实验一,选用90只ICR小鼠,采用抽签法随机分为3组(n=30):胸部皮瓣组、背部皮瓣组、腹部皮瓣组,再分别将各组小鼠按夹闭皮瓣蒂血管的时间(皮瓣缺血时间)分为6个亚组(n=5):Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅵ、Ⅴ、Ⅵ组,对应的缺血时间分别为0、1.5、3.0、5.0、8.0、10.0 h。胸部、背部、腹部皮瓣分别以左侧胸外侧动脉、胸背动脉、腹浅动脉为对称轴设计宽1.5 cm、长3.0 cm的轴型皮瓣。微型动脉夹夹闭血管蒂,建立缺血皮瓣模型。用全景激光灌注成像仪(FLPI)观察各组皮瓣基础血流量,再灌注7 d后观察皮瓣存活情况,计算坏死率,确定最佳小鼠皮瓣IRI模型。(2)实验二,选用另外72只ICR小鼠,建立上述胸部皮瓣IRI模型,按皮瓣缺血时间分为6组(n=12):ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ、ⅴ、ⅵ组,对应的缺血时间分别为0、1.5、3.0、5.0、8.0、10.0 h,用FLPI动态观察各组皮瓣的血...

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【文章目录】：
材料与方法
    一、实验动物和主要试剂、仪器来源
        1.实验动物:
        2.主要仪器、仪器:
    二、实验一——小鼠不同皮瓣IRI模型的比较
        (一)动物分组
        (二)小鼠不同皮瓣IRI模型制备
            1.小鼠胸部皮瓣模型:
            2.背部皮瓣模型:
            3.腹部皮瓣模型:
        (三)FLPI测量皮瓣血流灌注量
        (四)皮瓣坏死率
    三、实验二——缺血再灌注对皮瓣影响机制的研究
        (一)动物分组
        (二)FLPI测量胸部皮瓣缺血再灌注过程血流灌注量变化
        (三)皮瓣坏死率
        (四)组织学分析
        (五)二氯氢化荧光素二乙酸酯细胞内活性氧检测探针法检测皮瓣细胞内活性氧含量
            1.单细胞悬液制备:
            2.荧光探针标记:
            3.荧光检测:
        (六)TUNEL技术检测凋亡细胞
        (七)ELISA检测再灌注24.0 h后皮瓣组织内TNF- α表达水平
    四、统计学处理
结 果
    一、实验一——小鼠不同皮瓣IRI模型的比较
        (一)不同部位皮瓣基础血流灌注量比较
        (二)缺血时间对不同部位皮瓣坏死率的影响
            1.胸部皮瓣:
            2.背部皮瓣:
            3.腹部皮瓣:
    二、实验二——缺血再灌注对皮瓣影响机制的研究
        (一)缺血时间对皮瓣再灌注血流量的影响
        (二)缺血时间对胸部皮瓣坏死率的影响
        (三)缺血时间对皮瓣组织学的影响
        (四)缺血时间对胸部皮瓣组织细胞内活性氧含量的影响
        (五)缺血时间对皮瓣细胞凋亡的影响
        (六)缺血时间对皮瓣组织内TNF-α表达水平的影响
讨 论



本文编号：3853191