NO抑制体外IFN-γ刺激成肌细胞/肌管NLRP3炎性小体活化

发布时间：2024-01-25 14:01

　　目的观察一氧化氮供体硝普钠(SNP)、一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)对体外炎性培养(IFN-γ刺激)成肌细胞/肌管NLRP3炎症小体活化的影响。方法利用IFN-γ刺激小鼠C2C12成肌细胞/肌管,q PCR和Western blot分析炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1)的形成及活化、ELISA检测细胞培养上清IL-1β的分泌。进一步利用L-NAME和SNP处理IFN-γ诱导的C2C12细胞/肌管,分析炎性小体的形成、活化及IL-1β的分泌。结果 IFN-γ刺激培养后,成肌细胞/肌管中NLRP3、ASC和mature-caspase-1表达水平上调(P<0.01)。较之未刺激的细胞,IFN-γ诱导会显著上调成肌细胞/肌管培养基中的IL-1β浓度(P<0.01)。SNP处理后6 h,分化肌管(IFN-γ刺激48 h)内炎性小体(ASC、NLRP3、caspase-1)mRNA和蛋白水平较单纯刺激细胞显著下调(P<0.01),L-NAME则上调ASC、NLRP3、caspase-1表达水平(P<0.05)。与上述结果一致,SNP和L-NAME处理同...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1. 1 材料
        1.1.1主要试剂
        1.1.2细胞
    1. 2 方法
        1.2.1细胞培养与分组
        1.2.2 RT-q PCR检测ASC、NLRP3、caspase-1基因表达
        1.2.3 Western blot检测ASC、NLRP3和caspase-1蛋白表达
        1.2.4 ELISA技术检测细胞上清中IL-1β表达
    1. 3 统计分析
2 结果
    2. 1 IFN-γ 对成肌细胞/ 分化肌管中ASC、NLRP3、caspase-1 表达的影响
    2. 2 SNP和L-NAME对IFN-γ 刺激48 h后分化肌管中ASC、NLRP3、caspase-1表达的影响
    2. 3IFN-γ 对成肌细胞/ 分化肌管培养基上清中IL-1β 的表达的影响及SNP和L-NAME对分化肌管培养基上清中IL-1β 的表达的影响
3 讨论



本文编号：3884947