腺相关病毒在小鼠乙肝模型的研究应用

发布时间：2024-02-25 17:27

　　乙型病毒性肝炎是由乙肝病毒(Hepatitis B virus, HBV)引起的、以肝脏炎性病变为主并可引起多器官功能障碍的传染病。HBV感染的动物模型为更好的进行HBV相关研究提供有力工具。腺相关病毒(Adeno-associated virus, AAV)因其宿主广泛、安全性强、介导外源基因持续表达等优点,作为病毒载体受到广泛关注。目前,一种携带1.3拷贝HBV基因组的8型腺相关病毒(rAAV8-1.3HBV)被成功用于建立持续感染的HBV小鼠模型。本课题以rAAV8-1.3HBV为参照,评价携带1.3拷贝HBV基因组的1型、2型、5型、9型腺相关病毒(rAAV1-1.3HBV、 rAAV2-1.3HBV、rAAV5-1.3HBV、rAAV9-1.3HBV)建立乙肝小鼠模型的效果。实验主要包括以下内容：(1)准备所需的5种血清型重组腺相关病毒,分别为携带1.3拷贝HBV基因组的1型、2型、5型、8型、9型腺相关病毒,采用定量PCR法测定5种病毒滴度。(2)细胞实验：将含腺相关病毒倒转末端重复序列元件与包含1.3个拷贝HBV基因组的HBV表达质粒(pAAV-1.3HBV)采用脂质体转...

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２－２?ＡＡＶ包装示患图

本部分生产的５种ｒＡＡＶ－１．３ＨＢＶ需要Ｈ种质粒，分别为ｐＡＡＶ－ｌＪＨＢＶ，包??装质粒和辅助质粒。ｐＡＡＶ－１．３ＨＢＶＷ包括１４５?ｂｐ的ＡＡＶＩＴＲ序列，１．３拷贝的??ＨＢＶ基因组（图２－１）；包装质粒包括ＡＡＶ的复制蛋白（Ｒｅｐ）和外壳蛋白（Ｒｅｐ）；??辅助质粒，....

图２－５?ＡＡＶ基因组示意困??

?北京化工大学硕±学位论文???（４）分离胶板，暴露出ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶，弃去积层胶，选用己配置好的考马斯亮蓝??染色液染色，之后脱色３?ｈ，把凝胶放在凝胶成像系统后Ｉ使用计算机中的固定??程序拍照保存。??２．?５．?２点杂交方法測定重组ＡＡＶ病巧巧度??ＣＭＶ后动子是病毒基因....

图２－２?ＡＡＶ包装示患图

本部分生产的５种ｒＡＡＶ－１．３ＨＢＶ需要Ｈ种质粒，分别为ｐＡＡＶ－ｌＪＨＢＶ，包??装质粒和辅助质粒。ｐＡＡＶ－１．３ＨＢＶＷ包括１４５?ｂｐ的ＡＡＶＩＴＲ序列，１．３拷贝的??ＨＢＶ基因组（图２－１）；包装质粒包括ＡＡＶ的复制蛋白（Ｒｅｐ）和外壳蛋白（Ｒｅｐ）；??辅助质粒，....

图２－５?ＡＡＶ基因组示意困??

?北京化工大学硕±学位论文???（４）分离胶板，暴露出ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶，弃去积层胶，选用己配置好的考马斯亮蓝??染色液染色，之后脱色３?ｈ，把凝胶放在凝胶成像系统后Ｉ使用计算机中的固定??程序拍照保存。??２．?５．?２点杂交方法測定重组ＡＡＶ病巧巧度??ＣＭＶ后动子是病毒基因....

本文编号：3910647