p53和NF-κB信号通路在MTB感染AECⅡ细胞中的免疫调控作用研究

发布时间：2024-04-27 22:59

　　目的：研究在结核分枝杆菌（MTB）感染肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）过程中，p53和NF-κB信号通路中相关信号分子是否参与了抗结核的先天免疫调控。方法：利用实时荧光定量PCR、Western blot和蛋白芯片技术，通过过表达和抑制AECⅡ细胞中的p53和NF-κB基因，分析在牛结核分枝杆菌弱毒株卡介苗（BCG）感染过程中p53和NF-κB信号通路的信号分子和细胞炎症因子的表达变化，并探讨p53与NF-κB信号通路在AECⅡ细胞抗MTB感染免疫应答中的“cross-talk”关系。结果：在A549细胞中，p53信号通路通过p53协同CBP来负调控NF-κB、TLR-4及TRAF6的表达，从而抑制NF-κB信号通路的活化，并上调IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达；而NF-κB信号通路通过NF-κB协同TLR-4、TRAF6与CBP来负调控p53与MDM2的表达，从而抑制p53信号通路的激活，同时上调了IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ的表达。当BCG感染A549细胞时，p53信号通路中p53协同MDM2负调控CBP，进而上调NF-κB信号通路的TLR-4和TRAF6...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 试剂
        1.1.2 实验仪器
    1.2 方法
        1.2.1 菌种与细胞培养
        1.2.2 MTB感染A549细胞模型
        1.2.3 p53和NF-κB基因过表达/干扰A549细胞模型建立
            1.2.3. 1 p53基因
            1.2.3. 2 NF-κB基因
            1.2.4q PCR分析
        1.2.5 Western blot分析
        1.2.6 炎症因子的蛋白定量芯片分析
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 p53和NF-κB干扰/过表达A549细胞模型的建立
    2.2 MTB感染A549细胞后p53/NF-κB信号通路基因m RNA表达分析
        2.2.1 p53基因过表达/干扰的A549细胞m RNA表达分析
        2.2.2 NF-κB基因过表达/干扰的A549细胞m RNA表达分析
    2.3 MTB感染A549细胞后p53/NF-κB信号通路分子的蛋白表达分析
        2.3.1 p53基因过表达/干扰的A549细胞蛋白表达分析
        2.3.2 A549细胞NF-κB基因过表达/干扰后蛋白的表达分析
    2.4 MTB感染基因过表达/干扰A549细胞后炎症因子的蛋白芯片分析
3 讨论



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