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人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因的克隆及其蛋白的表达和纯化

发布时间:2022-12-04 19:17
  谷胱甘肽 S-转移酶(Glutathione-S-Transferase,GSTs)是一组具有多种生理功能的二聚体蛋白超基因家族酶系,GSTs能催化还原型谷胱甘肽的巯基结合到疏水的化合物上,使其失去结合DNA的活性,亲电子物质变成亲水物质,易于从胆汁或尿液中排泄,通过这种方式将体内、外源性化合物,如致癌物、断裂剂产生的亲电子物质、有潜在毒性的物质及亲脂性化合物等降解排除。因此GSTs在机体转化有毒化合物、保护细胞免受急性毒物攻击且在抑制细胞癌变中发挥重要作用。已有证据表明,某些GSTs活性的丧失与肺癌、头颈部、膀胱和结肠癌的高频发生成正相关。GSTPi是GSTs超基因家族中π家族的成员,在肺脏的含量尤为丰富。由于GSTPi对芳香族化合物具有高降解活性,在解毒致癌原、预防癌肿发生过程中的重要作用,与毒理学、职业肿瘤及肺癌存在密切关系。 本研究用RT-PCR技术从人胎盘组织获取人谷胱甘肽硫转移酶Pi(GSTPi)基因的cDNA序列,将其扩增产物GSTPi基因插入到原核克隆载体pMD18-T中,用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒pMD18-T-GSTP... 

【文章页数】:77 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
论文部分
    题目 人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因的克隆及其蛋白的表达和纯化
        中文摘要
        英文摘要
        前言
    第一部分 人GSTPi基因的克隆与序列分析
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
    第二部分 GSTPi原核表达体系的构建,蛋白的表达与纯化
        材料与方法
        结果
        讨论
        小结
    全文总结
    参考文献
综述部分
    题目 人谷胱甘肽硫转移酶Pi基因与肿瘤研究
    参考文献
缩略词表
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控表达[J]. 陈萍萍,吴逸明,张朝武,吴拥军.  卫生研究. 2003(03)
[2]高密度培养大肠杆菌表达重组人胰高血糖素样肽-1[J]. 张志珍,毛积芳,杨生生,窦鸿.  第二军医大学学报. 2002(03)
[3]转导GST-pi基因表达抑制甲基丙烯酸环氧丙酯的致癌作用[J]. 张敏磊,方福德.  科学通报. 1999(13)
[4]RT-PCR定量检测GST-π mRNA的表达[J]. 陈高明,李春海,王尧河,冯东晓,孙丽亚,朱运峰.  中国肿瘤临床. 1998(12)
[5]包涵体重组蛋白的纯化及复性[J]. 纪剑飞,张成刚.  沈阳药科大学学报. 1998(04)
[6]肺癌患者血浆GST-π水平测定及其临床意义[J]. 戴广海,石廷章,李春海.  中华肿瘤杂志. 1997(05)
[7]谷胱甘肽S─转移酶基因型多态性问题[J]. 沈建华,林国芳,谭靖伟.  卫生毒理学杂志. 1996(03)
[8]含PRPL启动子的原核高效表达载体的组建及其应用[J]. 张智清,姚立红,侯云德.  病毒学报. 1990(02)



本文编号:3708840

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