应用布鲁菌外膜蛋白单克隆抗体检测布病患者外周血PBMCs中菌体抗原的研究

发布时间：2024-01-28 10:08

　　背景布鲁菌病(简称布病),是由布鲁菌(简称布菌)引起的一种严重的人畜共患传染病。人感染布菌后容易转为慢性,引起多器官损伤。目前布病的实验室诊断主要以血清学检测抗体为主,存在不同程度的交叉反应,不能真实地反映患者胞内的携菌情况。布病的病原学检测以菌培养作为“金标准”,但其分离率较低,操作存在较大的生物安全风险。核酸检测也是当前的研究热点,其操作的简便性尚不能满足大多临床诊断要求。直接检测布病患者细胞内的病原体或布菌抗原,对于布病的诊断和治疗效果评价具有重要意义。然而,这一领域的研究报道尚不多见。目的本研究拟通过制备、筛选和鉴定特异性布菌外膜蛋白单克隆抗体,建立针对布病患者外周血单个核细胞(PBMCs)内布菌抗原的流式细胞检测方法,用于布病临床治疗效果评价。方法1.材料重组布菌外膜蛋白Omp31、Bp26和Omp25;布菌外膜蛋白特异性单克隆抗体及其杂交瘤细胞;灭活布菌菌体,包括牛种(B.abortus 2308、104M和S19菌株),羊种(B.melitensis M5-90)和猪种(B.suis S2);异硫氰酸荧光素(FITC),藻红蛋白(r-PE)标记试剂盒。2.研究对象52名布...

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【学位级别】：硕士

图１－４抗Ｏｍｐ２５单抗的抗原识别表位??Ｆｉｇｕｒｅ?１－４?Ｅｐｉｔｏｐｅ?ｍａｐｐｉｎｇ?ｏｆ?Ｏｍｐ２５??Ａ、ＥＬＩＳＡＭＡｂｓＯｍ２５；Ｂ、ＭＡｂＯｍ２５，??

图２－１?Ｏｍｐ２５、Ｂｐ２６和Ｏｍｐ３１重组表达载体双酶切鉴定??

图３－２不同抗体用量时ＦＣＭ检测的２９３ＦＴ阳性细胞数??

图３－４流式细胞术检测健康献血者ＰＢＭ?

本文编号：3887568