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犬弓首蛔虫卵黄原蛋白基因的克

发布时间:2022-11-12 16:51
  弓首蛔虫病(Toxocariasis)主要是由犬弓首蛔虫(Toxocara canis,T.canis)寄生于宿主小肠而引起的一类寄生虫病。该病具有世界性分布的特点,有数据显示,世界各地T.canis的感染率为0.9%~64.7%。其感染性虫卵不仅可以感染犬,还可以感染多种动物及人类,能引起眼睛幼虫移行症(Ocular larva migrans,OLM)、神经幼虫移行症(Nerve larvae migration,NLM)、隐秘幼虫移行症(Cryptic larval migration,CLM)和内脏幼虫移行症(Visceral larva migrans,VLM),导致严重的病理综合征。因此,该病在兽医公共卫生学上具有十分重要的意义。卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)是脂质转运蛋白家族成员之一,通常是在卵生非哺乳动物的卵巢外组织中合成,经卵黄原蛋白受体(Vitellogenin receptor,Vg R)介导的胞吞作用进入卵巢,分解为卵黄蛋白(Yolk protein,YP)、卵黄脂磷蛋白(Lipovitellin,Lv)、卵黄高磷蛋白(Phosvitin,Pv)等... 

【文章页数】:78 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 寄生虫与宿主的相互作用
        1.1.1 寄生虫对宿主的危害
        1.1.2 寄生虫对宿主行为的改变
        1.1.3 宿主对寄生虫的影响
    1.2 卵黄原蛋白概述
        1.2.1 卵黄原蛋白的合成
        1.2.2 卵黄原蛋白的结构
        1.2.3 卵黄原蛋白的功能
    1.3 线虫卵黄原蛋白研究进展
    1.4 结语
第二章 引言
    2.1 研究背景及意义
    2.2 主要研究内容
    2.3 试验技术路线
第三章 犬弓首蛔虫卵黄原蛋白基因的生物信息学分析
    3.1 试验方法
        3.1.1 生物信息分析软件
        3.1.2 进化关系分析
    3.2 结果
        3.2.1 TcVg信号肽预测
        3.2.2 TcVg理化性质分析
        3.2.3 TcVg卷曲螺旋预测与亚细胞定位分析
        3.2.4 TcVg二级结构预测
        3.2.5 TcVg功能结构域分析
        3.2.6 TcVg磷酸化位点分析
        3.2.7 TcVg系统发育关系
        3.2.8 TcVg功能预测
    3.3 分析与讨论
第四章 Tc-vwd、Tc-duf1943结构域的克隆及功能分析
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
    4.2 试验结果
        4.2.1 Tc-vwd与Tc-duf1943结构域克隆
        4.2.2 阳性重组质粒的筛选
        4.2.3 TcvWD与TcDUF1943三维结构预测
        4.2.4 TcvWD与TcDUF1943功能预测
    4.3 分析与讨论
第五章 Tc-vwd、Tc-duf1943表达载体的构建及原核表达
    5.1 材料与方法
        5.1.1 试验材料
        5.1.2 试验方法
    5.2 试验结果
        5.2.1 Tc-vwd/pET28a和Tc-duf1943/pET28a表达质粒的构建
        5.2.2 TcvWD和TcDUF1943表达形式的鉴定
        5.2.3 TcvWD和TcDUF1943表达条件优化
    5.3 分析与讨论
第六章 TcvWD多克隆抗体的制备及Western blot检测
    6.1 材料与方法
        6.1.1 试验材料
        6.1.2 试验方法
    6.2 试验结果
        6.2.1 TcvWD重组蛋白的纯化
        6.2.2 TcvWD多克隆抗体的制备
        6.2.3 TcvWD多克隆抗体纯度的鉴定
        6.2.4 TcvWD多克隆抗体的特异性
    6.3 分析和讨论
第七章 犬弓首蛔虫卵黄原蛋白的组织分布研究
    7.1 材料与方法
        7.1.1 试验材料
        7.1.2 试验方法
    7.2 试验结果
        7.2.1 qRT-PCR的特异性
        7.2.2 Tc-vg半定量PCR检测
        7.2.3 Tc-vg的组织差异表达
        7.2.4 T. canis组织H&E染色
        7.2.5 TcVg在雌虫组织中的分布
        7.2.6 TcVg在雄虫组织中的分布
    7.3 分析与讨论
第八章 全文总结
参考文献
附录
在学期间发表论文
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]Current status of diagnosis and treatment of hepatic echinococcosis[J]. Memmet Mihmanli,Ufuk Oguz Idiz,Cemal Kaya,Uygar Demir,Ozgur Bostanci,Sinan Omeroglu,Emre Bozkurt.  World Journal of Hepatology. 2016(28)
[2]猪蛔虫性别特异基因在第三、四期幼虫的表达谱研究[J]. 邹丰才,黄翠琴,李明伟,林瑞庆,宋慧群,廖申权,陈宁,朱兴全.  中国预防兽医学报. 2006(05)



本文编号:3706727

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