产抗菌脂肽GD菌株筛选及脂肽分离、鉴定与应用研究
发布时间：2022-12-05 00:54
抗菌脂肽本质上属于抗菌肽的一种,是部分芽孢杆菌及非芽孢杆菌在生长繁殖过程中由细菌非核糖体产生的一类环状脂肽化合物,具有抗菌范围广、抗菌效果好、不易产生耐药性等诸多特点,是一类绿色、安全、高效的抗生素替代品,目前,越来越多的科研工作者将研究方向转移到此类抗菌物质的研发上。本研究在核查分离保存的微生物资源时,筛选并获得了一株对病原菌具有明显抑杀作用的枯草芽孢杆菌GD菌株,围绕该菌株及其抗菌活性物质进行了一系列研究,包括对枯草芽孢杆菌GD菌株常规生理生化及16S rDNA基因鉴定；对产生的抗菌物质进行了分离、纯化、鉴定；同时对其作用机理及理化因素影响、安全评价、动物试验和产业化发酵生产工艺等初步研究。研究结果表明：该菌株产生的代谢产物具有良好的抑菌效果,是一类绿色环保、安全高效的抗菌脂肽类化合物。 1、为了获得产抗菌物质的芽孢杆菌菌株作为后续研究对象,本实验采用鸡源大肠杆菌02作为指示菌,对研究所分离、保存的29株芽孢杆菌的代谢产物进行了抑菌效果检测,获得了4株抑菌圈在15mm以上芽孢杆菌；在此基础上,对其抗菌活性进行了抑菌谱的测定及理化因素稳定性试验,发现一株芽孢杆菌产生的抗菌物质对...
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
文献综述
前言
1 抗菌脂肽与抗菌肽
2 抗菌脂肽研究进展(一)
2.1 抗菌脂肽与产生菌株
2.2 抗菌脂肽合成机制
3 抗菌脂肽研究进展(二)
3.1 发酵工艺与分离纯化
3.2 抗菌脂肽结构、特征
3.3 脂肽化合物质量指纹谱分析
3.4 抗菌脂肽作用机理
4 抗菌脂肽的应用
4.1 新型抗菌药物
4.2 新型饲料添加剂
5 研究目的与主要内容
5.1 目的与意义
5.2 主要内容
参考文献
第一章 产抗菌物质GD菌株鉴定及理化因素对其抗菌活性影响
1.1 材料与方法
1.1.1 材料
1.1.2 方法
1.2 结果与分析
1.2.1 菌株筛选
1.2.2 理化因素对GD菌株代谢产物抑菌效果影响
1.2.3 GD菌株鉴定
1.3 讨论
参考文献
第二章 GD菌株产脂肽化合物分离、纯化与鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 GD菌株抗菌物质TLC层析结果
2.2.2 GD菌株脂肽HPLC分离纯化结果
2.2.3 菌株GD脂肽粗提物几个主峰的含量比较
2.2.4 菌株GD脂肽类化合物的相对分子质量分析
2.3 讨论
参考文献
第三章 GD菌株产脂肽化合物体外抑菌效果研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果和分析
3.2.1 MIC测定结果
3.2.2 对鸡源大肠杆菌O_2生长曲线的影响
3.2.3 对鸡源大肠杆菌O_2菌体细胞膜通透性的影响
3.2.4 对鸡源大肠杆菌O_2显微特征的影响观察
3.2.5 对鸡源大肠杆菌O_2细胞代谢的影响
3.3 讨论
参考文献
第四章 脂肽化合物安全评价及动物应用效果评价
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 结果与分析
4.2.1 急性毒性
4.2.2 亚急性毒性试验
4.3 讨论
参考文献
第五章 抗菌脂肽发酵工艺的初步研究
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 结果与分析
5.2.1 培养基成分筛选结果
5.2.2 发酵工艺参数筛选结果
5.2.3 扩大发酵规模验证实验
5.3 讨论
参考文献
研究成果及创新
英文缩略词
在读博士学位期间发表的文章
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳豆菌抗菌脂肽对副溶血弧菌的抑菌机理[J]. 刘唤明,孙力军,王雅玲,徐德峰,刘阳,陈宏,唐晓山. 食品科学. 2012(15)
[2]纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究[J]. 刘唤明,孙力军,王雅玲,徐德峰,刘阳,陈宏,唐晓山. 食品工业科技. 2012(11)
[3]枯草芽孢杆菌对植物病害生物防治的作用机理[J]. 赵新林,赵思峰. 湖北农业科学. 2011(15)
[4]Bacillus amyloliquefaciens ES-2发酵产抗菌脂肽消泡剂的筛选及脂肽的提取和纯化[J]. 魏浩,陆兆新,吕凤霞,翟亚楠,郭昊,郝慧,别小妹. 中国生物工程杂志. 2011(02)
[5]枯草芽孢杆菌抗菌脂肽对嗜水气单胞菌抑菌效果[J]. 杨丽莉,吕凤霞,别小妹,何义进,王恬,陆兆新. 食品科学. 2011(01)
[6]抗菌脂肽对肉鸡生产性能和免疫机能的影响[J]. 都海明,戚广州,王建军,张旭晖,陆兆新,王恬. 江苏农业学报. 2010(05)
[7]抗菌肽的研究与应用[J]. 郑加兰. 江西饲料. 2010(01)
[8]培养基对解淀粉芽孢杆菌ES-2菌株产抗菌脂肽的影响[J]. 孙力军,陆兆新,别小妹,吕凤霞,方传记. 中国农业科学. 2008(10)
[9]淀粉液化芽孢杆菌抗菌脂肽发酵培养基及发酵条件的优化[J]. 方传记,陆兆新,孙力军,别小妹,吕凤霞,黄现青. 中国农业科学. 2008(02)
[10]抗菌肽的特性及其在畜牧生产中的应用[J]. 胡国良,黄兴国,杨承剑,王超,范志勇. 中国畜牧兽医文摘. 2007(06)
博士论文
[1]脂肽生物表面活性剂的发酵生产及其结构、性质研究[D]. 丁立孝.浙江大学 2004
本文编号：3709338
【文章页数】：107 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
文献综述
前言
1 抗菌脂肽与抗菌肽
2 抗菌脂肽研究进展(一)
2.1 抗菌脂肽与产生菌株
2.2 抗菌脂肽合成机制
3 抗菌脂肽研究进展(二)
3.1 发酵工艺与分离纯化
3.2 抗菌脂肽结构、特征
3.3 脂肽化合物质量指纹谱分析
3.4 抗菌脂肽作用机理
4 抗菌脂肽的应用
4.1 新型抗菌药物
4.2 新型饲料添加剂
5 研究目的与主要内容
5.1 目的与意义
5.2 主要内容
参考文献
第一章 产抗菌物质GD菌株鉴定及理化因素对其抗菌活性影响
1.1 材料与方法
1.1.1 材料
1.1.2 方法
1.2 结果与分析
1.2.1 菌株筛选
1.2.2 理化因素对GD菌株代谢产物抑菌效果影响
1.2.3 GD菌株鉴定
1.3 讨论
参考文献
第二章 GD菌株产脂肽化合物分离、纯化与鉴定
2.1 材料与方法
2.1.1 材料
2.1.2 方法
2.2 结果与分析
2.2.1 GD菌株抗菌物质TLC层析结果
2.2.2 GD菌株脂肽HPLC分离纯化结果
2.2.3 菌株GD脂肽粗提物几个主峰的含量比较
2.2.4 菌株GD脂肽类化合物的相对分子质量分析
2.3 讨论
参考文献
第三章 GD菌株产脂肽化合物体外抑菌效果研究
3.1 材料与方法
3.1.1 材料
3.1.2 方法
3.2 结果和分析
3.2.1 MIC测定结果
3.2.2 对鸡源大肠杆菌O_2生长曲线的影响
3.2.3 对鸡源大肠杆菌O_2菌体细胞膜通透性的影响
3.2.4 对鸡源大肠杆菌O_2显微特征的影响观察
3.2.5 对鸡源大肠杆菌O_2细胞代谢的影响
3.3 讨论
参考文献
第四章 脂肽化合物安全评价及动物应用效果评价
4.1 材料与方法
4.1.1 材料
4.1.2 方法
4.2 结果与分析
4.2.1 急性毒性
4.2.2 亚急性毒性试验
4.3 讨论
参考文献
第五章 抗菌脂肽发酵工艺的初步研究
5.1 材料与方法
5.1.1 材料
5.1.2 方法
5.2 结果与分析
5.2.1 培养基成分筛选结果
5.2.2 发酵工艺参数筛选结果
5.2.3 扩大发酵规模验证实验
5.3 讨论
参考文献
研究成果及创新
英文缩略词
在读博士学位期间发表的文章
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]纳豆菌抗菌脂肽对副溶血弧菌的抑菌机理[J]. 刘唤明,孙力军,王雅玲,徐德峰,刘阳,陈宏,唐晓山. 食品科学. 2012(15)
[2]纳豆菌脂肽对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究[J]. 刘唤明,孙力军,王雅玲,徐德峰,刘阳,陈宏,唐晓山. 食品工业科技. 2012(11)
[3]枯草芽孢杆菌对植物病害生物防治的作用机理[J]. 赵新林,赵思峰. 湖北农业科学. 2011(15)
[4]Bacillus amyloliquefaciens ES-2发酵产抗菌脂肽消泡剂的筛选及脂肽的提取和纯化[J]. 魏浩,陆兆新,吕凤霞,翟亚楠,郭昊,郝慧,别小妹. 中国生物工程杂志. 2011(02)
[5]枯草芽孢杆菌抗菌脂肽对嗜水气单胞菌抑菌效果[J]. 杨丽莉,吕凤霞,别小妹,何义进,王恬,陆兆新. 食品科学. 2011(01)
[6]抗菌脂肽对肉鸡生产性能和免疫机能的影响[J]. 都海明,戚广州,王建军,张旭晖,陆兆新,王恬. 江苏农业学报. 2010(05)
[7]抗菌肽的研究与应用[J]. 郑加兰. 江西饲料. 2010(01)
[8]培养基对解淀粉芽孢杆菌ES-2菌株产抗菌脂肽的影响[J]. 孙力军,陆兆新,别小妹,吕凤霞,方传记. 中国农业科学. 2008(10)
[9]淀粉液化芽孢杆菌抗菌脂肽发酵培养基及发酵条件的优化[J]. 方传记,陆兆新,孙力军,别小妹,吕凤霞,黄现青. 中国农业科学. 2008(02)
[10]抗菌肽的特性及其在畜牧生产中的应用[J]. 胡国良,黄兴国,杨承剑,王超,范志勇. 中国畜牧兽医文摘. 2007(06)
博士论文
[1]脂肽生物表面活性剂的发酵生产及其结构、性质研究[D]. 丁立孝.浙江大学 2004
本文编号：3709338
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